畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2008年
6期
832-836
,共5页
王文秀%邓文%张彦明%代晨%熊奎州%谢林红%温元鹏
王文秀%鄧文%張彥明%代晨%熊奎州%謝林紅%溫元鵬
왕문수%산문%장언명%대신%웅규주%사림홍%온원붕
脐静脉内皮细胞%转化生长因子β1(TGF-β1)%转染
臍靜脈內皮細胞%轉化生長因子β1(TGF-β1)%轉染
제정맥내피세포%전화생장인자β1(TGF-β1)%전염
应用RT-PCR技术从猪外周血单个核细胞扩增转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)全基因,构建含有TGF-β1基因及EGFP报告基因的真核表达质粒pEGFP-C1-TGF-β1.采用脂质体法转染体外培养的猪脐静脉内皮细胞(SUVECs)后,通过直接荧光观察pEGFP-C1-TGF-β1融合蛋白在细胞中的分布定位,并通过RT-PCR、间接免疫荧光方法检测TGF-β1基因在SUVECs中的表达.结果在转染后1周观察到绿色荧光,RT-PCR、间接免疫荧光法检测TGF-β1表达均为阳性.本研究成功构建了含有绿色荧光蛋白基因的真核表达载体pEGFP-C1-TGF-β1,且TGF-β1基因在SUVECs中获得表达.
應用RT-PCR技術從豬外週血單箇覈細胞擴增轉化生長因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)全基因,構建含有TGF-β1基因及EGFP報告基因的真覈錶達質粒pEGFP-C1-TGF-β1.採用脂質體法轉染體外培養的豬臍靜脈內皮細胞(SUVECs)後,通過直接熒光觀察pEGFP-C1-TGF-β1融閤蛋白在細胞中的分佈定位,併通過RT-PCR、間接免疫熒光方法檢測TGF-β1基因在SUVECs中的錶達.結果在轉染後1週觀察到綠色熒光,RT-PCR、間接免疫熒光法檢測TGF-β1錶達均為暘性.本研究成功構建瞭含有綠色熒光蛋白基因的真覈錶達載體pEGFP-C1-TGF-β1,且TGF-β1基因在SUVECs中穫得錶達.
응용RT-PCR기술종저외주혈단개핵세포확증전화생장인자β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)전기인,구건함유TGF-β1기인급EGFP보고기인적진핵표체질립pEGFP-C1-TGF-β1.채용지질체법전염체외배양적저제정맥내피세포(SUVECs)후,통과직접형광관찰pEGFP-C1-TGF-β1융합단백재세포중적분포정위,병통과RT-PCR、간접면역형광방법검측TGF-β1기인재SUVECs중적표체.결과재전염후1주관찰도록색형광,RT-PCR、간접면역형광법검측TGF-β1표체균위양성.본연구성공구건료함유록색형광단백기인적진핵표체재체pEGFP-C1-TGF-β1,차TGF-β1기인재SUVECs중획득표체.
