生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2009年
4期
417-423
,共7页
张可%赵伟东%李强%方文刚%朱莉%陈誉华
張可%趙偉東%李彊%方文剛%硃莉%陳譽華
장가%조위동%리강%방문강%주리%진예화
ibeT%大肠杆菌K1株%人脑微血管内皮细胞%溶酶体%逃逸
ibeT%大腸桿菌K1株%人腦微血管內皮細胞%溶酶體%逃逸
ibeT%대장간균K1주%인뇌미혈관내피세포%용매체%도일
大肠杆菌是导致新生儿细菌性脑膜炎最常见的革兰氏阴性致病菌.为探讨毒力岛基因ibeT在大肠杆菌K1株致病过程中的作用,构建了ibeT基因缺失的大肠杆菌K1株,细菌在细胞内存活试验结果显示,ibeT基因缺失抑制了大肠杆菌K1株在人脑微血管内皮细胞中的生长.利用激光共聚焦扫描显微镜观察到,在细菌侵袭进入人脑微血管内皮细胞后,与野生型相比,ibeT基因缺失突变株较多地滞留在溶酶体内;透射电镜结果进一步显示,ibeT基因缺失使大肠杆菌K1株逃逸ECV(含有大肠杆茼的囊泡)的能力发生了下降,继而使其在细胞浆内的复制减少.利用体外模拟的弱酸性环境,检测大肠杆菌菌体胞内的缓冲容量,发现ibeT基因缺失突变株菌体胞内的缓冲能力较野生型低.这些结果提示,在大肠杆茼K1株侵袭进入人脑微血管内皮细胞后,ibeT基因有利于大肠杆菌降解ECV膜,避免与溶酶体融合,进而促使大肠杆菌逃逸进入细胞浆并进行复制.
大腸桿菌是導緻新生兒細菌性腦膜炎最常見的革蘭氏陰性緻病菌.為探討毒力島基因ibeT在大腸桿菌K1株緻病過程中的作用,構建瞭ibeT基因缺失的大腸桿菌K1株,細菌在細胞內存活試驗結果顯示,ibeT基因缺失抑製瞭大腸桿菌K1株在人腦微血管內皮細胞中的生長.利用激光共聚焦掃描顯微鏡觀察到,在細菌侵襲進入人腦微血管內皮細胞後,與野生型相比,ibeT基因缺失突變株較多地滯留在溶酶體內;透射電鏡結果進一步顯示,ibeT基因缺失使大腸桿菌K1株逃逸ECV(含有大腸桿茼的囊泡)的能力髮生瞭下降,繼而使其在細胞漿內的複製減少.利用體外模擬的弱痠性環境,檢測大腸桿菌菌體胞內的緩遲容量,髮現ibeT基因缺失突變株菌體胞內的緩遲能力較野生型低.這些結果提示,在大腸桿茼K1株侵襲進入人腦微血管內皮細胞後,ibeT基因有利于大腸桿菌降解ECV膜,避免與溶酶體融閤,進而促使大腸桿菌逃逸進入細胞漿併進行複製.
대장간균시도치신생인세균성뇌막염최상견적혁란씨음성치병균.위탐토독력도기인ibeT재대장간균K1주치병과정중적작용,구건료ibeT기인결실적대장간균K1주,세균재세포내존활시험결과현시,ibeT기인결실억제료대장간균K1주재인뇌미혈관내피세포중적생장.이용격광공취초소묘현미경관찰도,재세균침습진입인뇌미혈관내피세포후,여야생형상비,ibeT기인결실돌변주교다지체류재용매체내;투사전경결과진일보현시,ibeT기인결실사대장간균K1주도일ECV(함유대장간동적낭포)적능력발생료하강,계이사기재세포장내적복제감소.이용체외모의적약산성배경,검측대장간균균체포내적완충용량,발현ibeT기인결실돌변주균체포내적완충능력교야생형저.저사결과제시,재대장간동K1주침습진입인뇌미혈관내피세포후,ibeT기인유리우대장간균강해ECV막,피면여용매체융합,진이촉사대장간균도일진입세포장병진행복제.
