北京理工大学学报
北京理工大學學報
북경리공대학학보
JOURNAL OF BEIJING INSTITUTE OF TECHNOLOGY
2009年
5期
465-470
,共6页
高海军%肖丹%杨永政%高芳芳%庞思平
高海軍%肖丹%楊永政%高芳芳%龐思平
고해군%초단%양영정%고방방%방사평
phlD基因%基因克隆%重组大肠杆菌%间苯三酚
phlD基因%基因剋隆%重組大腸桿菌%間苯三酚
phlD기인%기인극륭%중조대장간균%간분삼분
对荧光假单胞菌合成2,4-二乙酰基间苯三酚(2,4-DAPG)操纵子的关键基因phlD进行了克隆,并采用E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)对phlD进行了诱导表达,其指导合成的PhlD蛋白融合表达后为42000Da.生物信息学方法分析PhlD具有PKSⅢ型聚酮合酶的结构及催化聚酮缩合、酰基转移反应的功能,并推测PhlD催化底物丙二酸单酰辅酶A经过聚酮缩合途径合成间苯三酚及其衍生物.对重组菌进行了摇瓶发酵并检测出发酵液中确有产物间苯三酚的合成.
對熒光假單胞菌閤成2,4-二乙酰基間苯三酚(2,4-DAPG)操縱子的關鍵基因phlD進行瞭剋隆,併採用E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)對phlD進行瞭誘導錶達,其指導閤成的PhlD蛋白融閤錶達後為42000Da.生物信息學方法分析PhlD具有PKSⅢ型聚酮閤酶的結構及催化聚酮縮閤、酰基轉移反應的功能,併推測PhlD催化底物丙二痠單酰輔酶A經過聚酮縮閤途徑閤成間苯三酚及其衍生物.對重組菌進行瞭搖瓶髮酵併檢測齣髮酵液中確有產物間苯三酚的閤成.
대형광가단포균합성2,4-이을선기간분삼분(2,4-DAPG)조종자적관건기인phlD진행료극륭,병채용E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)대phlD진행료유도표체,기지도합성적PhlD단백융합표체후위42000Da.생물신식학방법분석PhlD구유PKSⅢ형취동합매적결구급최화취동축합、선기전이반응적공능,병추측PhlD최화저물병이산단선보매A경과취동축합도경합성간분삼분급기연생물.대중조균진행료요병발효병검측출발효액중학유산물간분삼분적합성.
