福建医科大学学报
福建醫科大學學報
복건의과대학학보
JOURNAL OF FUJIAN MEDICAL UNIVERSITY
2009年
3期
237-240
,共4页
陈闽%何姜%刘小莺%黄敬泽%王林曦%刘礼斌
陳閩%何薑%劉小鶯%黃敬澤%王林晞%劉禮斌
진민%하강%류소앵%황경택%왕림희%류례빈
胞间信号肽类和蛋白质类%基因%转染%腺病毒科
胞間信號肽類和蛋白質類%基因%轉染%腺病毒科
포간신호태류화단백질류%기인%전염%선병독과
目的 构建携带人脂联素基因的重组腺病毒载体,为进一步研究脂联素的功能提供实验基础.方法 以带有人脂联素基因的质粒pINCY-APM1为模板,聚合酶链反应扩增人脂联素基因APM1,并将其定向克隆于真核表达载体pDC315-EGFP,与辅助质粒pBHGlox⊿E1,3Cre共转染HEK293细胞,经位点特异重组包装得到重组腺病毒Ad-APM1.通过Real-time PCR和Western blot分别检测重组腺病毒Ad-APM1感染HEK293细胞后的表达.结果 重组腺病毒Ad-APM1包装成功,病毒滴度＞6.3×1012pfu/mL.Real-time PCR和Western blot检测证实APM1在HEK293中表达.结论 应用细胞内同源重组方法 成功构建了携带人脂联素基因的重组腺病毒.
目的 構建攜帶人脂聯素基因的重組腺病毒載體,為進一步研究脂聯素的功能提供實驗基礎.方法 以帶有人脂聯素基因的質粒pINCY-APM1為模闆,聚閤酶鏈反應擴增人脂聯素基因APM1,併將其定嚮剋隆于真覈錶達載體pDC315-EGFP,與輔助質粒pBHGlox⊿E1,3Cre共轉染HEK293細胞,經位點特異重組包裝得到重組腺病毒Ad-APM1.通過Real-time PCR和Western blot分彆檢測重組腺病毒Ad-APM1感染HEK293細胞後的錶達.結果 重組腺病毒Ad-APM1包裝成功,病毒滴度＞6.3×1012pfu/mL.Real-time PCR和Western blot檢測證實APM1在HEK293中錶達.結論 應用細胞內同源重組方法 成功構建瞭攜帶人脂聯素基因的重組腺病毒.
목적 구건휴대인지련소기인적중조선병독재체,위진일보연구지련소적공능제공실험기출.방법 이대유인지련소기인적질립pINCY-APM1위모판,취합매련반응확증인지련소기인APM1,병장기정향극륭우진핵표체재체pDC315-EGFP,여보조질립pBHGlox⊿E1,3Cre공전염HEK293세포,경위점특이중조포장득도중조선병독Ad-APM1.통과Real-time PCR화Western blot분별검측중조선병독Ad-APM1감염HEK293세포후적표체.결과 중조선병독Ad-APM1포장성공,병독적도＞6.3×1012pfu/mL.Real-time PCR화Western blot검측증실APM1재HEK293중표체.결론 응용세포내동원중조방법 성공구건료휴대인지련소기인적중조선병독.
