西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2011年
3期
379-384
,共6页
夏梅%任琎 %蒋青桃%李妍%唐小军%邱文%赵聃%王迎伟
夏梅%任琎 %蔣青桃%李妍%唐小軍%邱文%趙聃%王迎偉
하매%임진 %장청도%리연%당소군%구문%조담%왕영위
激活转录因子3%单克隆抗体%杂交瘤细胞%Western%blot%Thy-1肾炎%匙孔绒血蓝蛋白
激活轉錄因子3%單剋隆抗體%雜交瘤細胞%Western%blot%Thy-1腎炎%匙孔絨血藍蛋白
격활전록인자3%단극륭항체%잡교류세포%Western%blot%Thy-1신염%시공융혈람단백
目的 制备特异性识别大鼠激活转录因子3(ATF3)的单克隆抗体(mAb).方法 根据软件预测的结果合成偶联有匙孔绒血蓝蛋白(key hole limpet hemocyanin,KLH)的大鼠ATF3第168-181位氨基酸多肽.随后免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗大鼠ATF3的mAb.采用快速定性试纸法鉴定该单克隆抗体的亚型和亚类;通过ELISA、Western blot和免疫组织化学法鉴定单克隆抗体的特性.结果 获得一株可稳定分泌抗大鼠ATF3 mAb的杂交瘤细胞,其分泌的ATF3单抗的亚型是IgG1,轻链为κ链.Western blot结果显示,该单抗能够特异性识别大鼠细胞内表达的ATF3蛋白.免疫组织化学检测结果表明,在Thy-1肾炎(Thy-1N)大鼠肾细胞胞质及细胞核内均有ATF3表达,但细胞核内的表达量较为显著.结论 成功制备了一株抗大鼠ATF3的mAb,为进一步研究ATF3的生物学功能提供了可用的实验材料.
目的 製備特異性識彆大鼠激活轉錄因子3(ATF3)的單剋隆抗體(mAb).方法 根據軟件預測的結果閤成偶聯有匙孔絨血藍蛋白(key hole limpet hemocyanin,KLH)的大鼠ATF3第168-181位氨基痠多肽.隨後免疫BALB/c小鼠,運用雜交瘤技術製備抗大鼠ATF3的mAb.採用快速定性試紙法鑒定該單剋隆抗體的亞型和亞類;通過ELISA、Western blot和免疫組織化學法鑒定單剋隆抗體的特性.結果 穫得一株可穩定分泌抗大鼠ATF3 mAb的雜交瘤細胞,其分泌的ATF3單抗的亞型是IgG1,輕鏈為κ鏈.Western blot結果顯示,該單抗能夠特異性識彆大鼠細胞內錶達的ATF3蛋白.免疫組織化學檢測結果錶明,在Thy-1腎炎(Thy-1N)大鼠腎細胞胞質及細胞覈內均有ATF3錶達,但細胞覈內的錶達量較為顯著.結論 成功製備瞭一株抗大鼠ATF3的mAb,為進一步研究ATF3的生物學功能提供瞭可用的實驗材料.
목적 제비특이성식별대서격활전록인자3(ATF3)적단극륭항체(mAb).방법 근거연건예측적결과합성우련유시공융혈람단백(key hole limpet hemocyanin,KLH)적대서ATF3제168-181위안기산다태.수후면역BALB/c소서,운용잡교류기술제비항대서ATF3적mAb.채용쾌속정성시지법감정해단극륭항체적아형화아류;통과ELISA、Western blot화면역조직화학법감정단극륭항체적특성.결과 획득일주가은정분비항대서ATF3 mAb적잡교류세포,기분비적ATF3단항적아형시IgG1,경련위κ련.Western blot결과현시,해단항능구특이성식별대서세포내표체적ATF3단백.면역조직화학검측결과표명,재Thy-1신염(Thy-1N)대서신세포포질급세포핵내균유ATF3표체,단세포핵내적표체량교위현저.결론 성공제비료일주항대서ATF3적mAb,위진일보연구ATF3적생물학공능제공료가용적실험재료.
