军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2011年
6期
424-427
,共4页
朱娟娟%付汉江%朱捷%张胜权%郑晓飞
硃娟娟%付漢江%硃捷%張勝權%鄭曉飛
주연연%부한강%주첩%장성권%정효비
RNA%MEG3%基因表达%肝肿瘤%基因,p53%转染%逆转录聚合酶链反应
RNA%MEG3%基因錶達%肝腫瘤%基因,p53%轉染%逆轉錄聚閤酶鏈反應
RNA%MEG3%기인표체%간종류%기인,p53%전염%역전록취합매련반응
目的 构建人类长链非编码RNA母系表达基因3(MEG3)的真核表达载体,筛选MEG3稳定高表达的肝癌细胞株,分析MEG3过表达对p53转录活性的影响.方法 根据GenBank中MEG3的基因序列设计合成特异引物,从肝癌细胞中扩增MEG3的cDNA序列,将其构建入pcDNA3.0真核表达载体中,得到pcDNA3.0-MEG3表达载体,转染肝癌细胞SK-Hep-1,用G418筛选稳定株,采用RT-PCR技术检测转染细胞中MEG3基因表达,采用荧光素酶报告基因技术分析MEG3过表达细胞中对p53介导的基因转录活性的影响.结果 成功构建了MEG3真核表达质粒pcDNA3.0-MEG3,筛选获得了稳定高表达MEG3基因的SK-Hep-1肝癌细胞株,双荧光报告实验结果显示MEG3过表达能增强p53介导的转录激活作用.结论 本研究获得了稳定高表达MEG3基因的SK-Hep-1肝癌细胞株,为深入分析MEG3的功能及其作用机制奠定了基础.
目的 構建人類長鏈非編碼RNA母繫錶達基因3(MEG3)的真覈錶達載體,篩選MEG3穩定高錶達的肝癌細胞株,分析MEG3過錶達對p53轉錄活性的影響.方法 根據GenBank中MEG3的基因序列設計閤成特異引物,從肝癌細胞中擴增MEG3的cDNA序列,將其構建入pcDNA3.0真覈錶達載體中,得到pcDNA3.0-MEG3錶達載體,轉染肝癌細胞SK-Hep-1,用G418篩選穩定株,採用RT-PCR技術檢測轉染細胞中MEG3基因錶達,採用熒光素酶報告基因技術分析MEG3過錶達細胞中對p53介導的基因轉錄活性的影響.結果 成功構建瞭MEG3真覈錶達質粒pcDNA3.0-MEG3,篩選穫得瞭穩定高錶達MEG3基因的SK-Hep-1肝癌細胞株,雙熒光報告實驗結果顯示MEG3過錶達能增彊p53介導的轉錄激活作用.結論 本研究穫得瞭穩定高錶達MEG3基因的SK-Hep-1肝癌細胞株,為深入分析MEG3的功能及其作用機製奠定瞭基礎.
목적 구건인류장련비편마RNA모계표체기인3(MEG3)적진핵표체재체,사선MEG3은정고표체적간암세포주,분석MEG3과표체대p53전록활성적영향.방법 근거GenBank중MEG3적기인서렬설계합성특이인물,종간암세포중확증MEG3적cDNA서렬,장기구건입pcDNA3.0진핵표체재체중,득도pcDNA3.0-MEG3표체재체,전염간암세포SK-Hep-1,용G418사선은정주,채용RT-PCR기술검측전염세포중MEG3기인표체,채용형광소매보고기인기술분석MEG3과표체세포중대p53개도적기인전록활성적영향.결과 성공구건료MEG3진핵표체질립pcDNA3.0-MEG3,사선획득료은정고표체MEG3기인적SK-Hep-1간암세포주,쌍형광보고실험결과현시MEG3과표체능증강p53개도적전록격활작용.결론 본연구획득료은정고표체MEG3기인적SK-Hep-1간암세포주,위심입분석MEG3적공능급기작용궤제전정료기출.
