中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2011年
7期
1347-1351
,共5页
周荣%陈凤%胡德耀%刘良明
週榮%陳鳳%鬍德耀%劉良明
주영%진봉%호덕요%류량명
血管内皮细胞%氧化性应激%预处理%26S蛋白酶体
血管內皮細胞%氧化性應激%預處理%26S蛋白酶體
혈관내피세포%양화성응격%예처리%26S단백매체
目的:观察在氧化应激耐受及氧化应激损伤的血管内皮细胞(VECs) 26S蛋白酶体LMP2亚基的表达变化情况,并评价26S蛋白酶体LMP2亚基在调节VECs对氧化应激耐受性中的可能作用.方法:建立H2O2诱导氧化应激损伤及氧化应激预处理VECs模型;采用细胞免疫荧光标记联合Western blotting法检测26S蛋白酶体LMP2的表达;采用脂质体LipofectamineTM 2000转染LMP2反义/正义寡核苷酸;检测培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)的活性及丙二醛(MDA)的含量.结果:H2O2可剂量及时间依赖性地诱导VECs氧化应激损伤,培养上清中MDA浓度及LDH活性明显增加;H2O2(10 μmol/L,24 h)预处理可诱导26S蛋白酶体LMP2亚基的高表达及细胞对H2O2 (500 μmol/L,3 h)诱导氧化应激的耐受,培养上清中MDA浓度及LDH活性明显减少;与H2O2 (500 μmol/L,3 h)处理组比较,采用干扰素γ(IFN-γ,20 μg/L,48 h)可诱导VECs 26S蛋白酶体LMP2亚基高表达,也可诱导VECs对H2O2的耐受,其培养上清中MDA浓度及LDH活性明显降低,而转染LMP2-反义寡核苷酸可抑制IFN-γ诱导的培养上皮细胞26S蛋白酶体LMP2亚基高表达并阻断细胞对H2O2 (500 μmol/L,3 h)的耐受.结论:26S蛋白酶体LMP2亚基参与VECs对氧化应激耐受性的形成.
目的:觀察在氧化應激耐受及氧化應激損傷的血管內皮細胞(VECs) 26S蛋白酶體LMP2亞基的錶達變化情況,併評價26S蛋白酶體LMP2亞基在調節VECs對氧化應激耐受性中的可能作用.方法:建立H2O2誘導氧化應激損傷及氧化應激預處理VECs模型;採用細胞免疫熒光標記聯閤Western blotting法檢測26S蛋白酶體LMP2的錶達;採用脂質體LipofectamineTM 2000轉染LMP2反義/正義寡覈苷痠;檢測培養上清中乳痠脫氫酶(LDH)的活性及丙二醛(MDA)的含量.結果:H2O2可劑量及時間依賴性地誘導VECs氧化應激損傷,培養上清中MDA濃度及LDH活性明顯增加;H2O2(10 μmol/L,24 h)預處理可誘導26S蛋白酶體LMP2亞基的高錶達及細胞對H2O2 (500 μmol/L,3 h)誘導氧化應激的耐受,培養上清中MDA濃度及LDH活性明顯減少;與H2O2 (500 μmol/L,3 h)處理組比較,採用榦擾素γ(IFN-γ,20 μg/L,48 h)可誘導VECs 26S蛋白酶體LMP2亞基高錶達,也可誘導VECs對H2O2的耐受,其培養上清中MDA濃度及LDH活性明顯降低,而轉染LMP2-反義寡覈苷痠可抑製IFN-γ誘導的培養上皮細胞26S蛋白酶體LMP2亞基高錶達併阻斷細胞對H2O2 (500 μmol/L,3 h)的耐受.結論:26S蛋白酶體LMP2亞基參與VECs對氧化應激耐受性的形成.
목적:관찰재양화응격내수급양화응격손상적혈관내피세포(VECs) 26S단백매체LMP2아기적표체변화정황,병평개26S단백매체LMP2아기재조절VECs대양화응격내수성중적가능작용.방법:건립H2O2유도양화응격손상급양화응격예처리VECs모형;채용세포면역형광표기연합Western blotting법검측26S단백매체LMP2적표체;채용지질체LipofectamineTM 2000전염LMP2반의/정의과핵감산;검측배양상청중유산탈경매(LDH)적활성급병이철(MDA)적함량.결과:H2O2가제량급시간의뢰성지유도VECs양화응격손상,배양상청중MDA농도급LDH활성명현증가;H2O2(10 μmol/L,24 h)예처리가유도26S단백매체LMP2아기적고표체급세포대H2O2 (500 μmol/L,3 h)유도양화응격적내수,배양상청중MDA농도급LDH활성명현감소;여H2O2 (500 μmol/L,3 h)처리조비교,채용간우소γ(IFN-γ,20 μg/L,48 h)가유도VECs 26S단백매체LMP2아기고표체,야가유도VECs대H2O2적내수,기배양상청중MDA농도급LDH활성명현강저,이전염LMP2-반의과핵감산가억제IFN-γ유도적배양상피세포26S단백매체LMP2아기고표체병조단세포대H2O2 (500 μmol/L,3 h)적내수.결론:26S단백매체LMP2아기삼여VECs대양화응격내수성적형성.