海洋通报
海洋通報
해양통보
MARINE SCIENCE BULLETIN
2012年
3期
308-313
,共6页
明红霞%董玉波%任莹利%王林同%朱琳
明紅霞%董玉波%任瑩利%王林同%硃琳
명홍하%동옥파%임형리%왕림동%주림
轮状病毒%感染性%ICC-qPCR%渤海湾%表层海水
輪狀病毒%感染性%ICC-qPCR%渤海灣%錶層海水
륜상병독%감염성%ICC-qPCR%발해만%표층해수
轮状病毒是引起婴幼儿急性腹泻的重要病原体之一,在水环境中存活时间长,导致人类感染的剂量低,因此寻求一种快速高效的定量检测海水中的轮状病毒方法势在必行.传统的细胞培养技术不但耗时,而且灵敏度低,现代分子生物学技术虽然克服了上述缺点,但是其感染性的信息无从获得.因此,本文建立了细胞培养结合实时定量PCR (ICC-qPCR)的方法,并于2010年冬季对渤海湾天津近岸重点海域表层海水中具有感染性的轮状病毒进行了定量调查.500 mL海水经浓缩,4.8h细胞培养之后,用qPCR方法在7个海水样品中检测出3个样品具有感染性,其测定值范围为1.8×102 copies-3.8×103copies,该海域感染性轮状病毒的含量为1～39 PFU/L.ICC-qPCR方法快速、灵敏,将细胞培养与实时定量PCR技术相结合,能对感染性病毒进行定量分析,因此有望在今后的水环境胃肠道病毒的监测中得到广泛应用.
輪狀病毒是引起嬰幼兒急性腹瀉的重要病原體之一,在水環境中存活時間長,導緻人類感染的劑量低,因此尋求一種快速高效的定量檢測海水中的輪狀病毒方法勢在必行.傳統的細胞培養技術不但耗時,而且靈敏度低,現代分子生物學技術雖然剋服瞭上述缺點,但是其感染性的信息無從穫得.因此,本文建立瞭細胞培養結閤實時定量PCR (ICC-qPCR)的方法,併于2010年鼕季對渤海灣天津近岸重點海域錶層海水中具有感染性的輪狀病毒進行瞭定量調查.500 mL海水經濃縮,4.8h細胞培養之後,用qPCR方法在7箇海水樣品中檢測齣3箇樣品具有感染性,其測定值範圍為1.8×102 copies-3.8×103copies,該海域感染性輪狀病毒的含量為1～39 PFU/L.ICC-qPCR方法快速、靈敏,將細胞培養與實時定量PCR技術相結閤,能對感染性病毒進行定量分析,因此有望在今後的水環境胃腸道病毒的鑑測中得到廣汎應用.
륜상병독시인기영유인급성복사적중요병원체지일,재수배경중존활시간장,도치인류감염적제량저,인차심구일충쾌속고효적정량검측해수중적륜상병독방법세재필행.전통적세포배양기술불단모시,이차령민도저,현대분자생물학기술수연극복료상술결점,단시기감염성적신식무종획득.인차,본문건립료세포배양결합실시정량PCR (ICC-qPCR)적방법,병우2010년동계대발해만천진근안중점해역표층해수중구유감염성적륜상병독진행료정량조사.500 mL해수경농축,4.8h세포배양지후,용qPCR방법재7개해수양품중검측출3개양품구유감염성,기측정치범위위1.8×102 copies-3.8×103copies,해해역감염성륜상병독적함량위1～39 PFU/L.ICC-qPCR방법쾌속、령민,장세포배양여실시정량PCR기술상결합,능대감염성병독진행정량분석,인차유망재금후적수배경위장도병독적감측중득도엄범응용.
