新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
7期
1190-1196
,共7页
张毓露%郝晓燕%足木热木%刘小利%陈果%陈勋基%黄全生
張毓露%郝曉燕%足木熱木%劉小利%陳果%陳勛基%黃全生
장육로%학효연%족목열목%류소리%진과%진훈기%황전생
玉米%基因%真核表达载体%重组质粒构建
玉米%基因%真覈錶達載體%重組質粒構建
옥미%기인%진핵표체재체%중조질립구건
[目的]CDPK是一类依赖于Ca2+而不依赖CaM及磷脂的蛋白激酶,或类钙调素结构域的蛋白激酶,是植物和低等动物所特有.研究为玉米CDPK基因家族在抗逆中的作用提供基础.[方法]构建玉米ZmCPK12基因真核表达载体是了解玉米中该基因功能的重要途径之一.实验利用RT - PCR技术扩增得到大小为1 533 bp的玉米ZmCPK12基因,经限制性内切酶SalI和NotI进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP -5N连接,获得重组真核表达质粒ZmCPK12 - 5N.[结果]通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒ZmCPK12-5N构建成功.制备酵母感受态,将重组质粒电击转人酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功.[结论]成功构建了玉米mCPK12基因真核表达载体,并且成功转化了酵母.
[目的]CDPK是一類依賴于Ca2+而不依賴CaM及燐脂的蛋白激酶,或類鈣調素結構域的蛋白激酶,是植物和低等動物所特有.研究為玉米CDPK基因傢族在抗逆中的作用提供基礎.[方法]構建玉米ZmCPK12基因真覈錶達載體是瞭解玉米中該基因功能的重要途徑之一.實驗利用RT - PCR技術擴增得到大小為1 533 bp的玉米ZmCPK12基因,經限製性內切酶SalI和NotI進行消化,將目的基因與真覈錶達質粒pREP -5N連接,穫得重組真覈錶達質粒ZmCPK12 - 5N.[結果]通過菌落PCR、雙酶切及測序等方法進行鑒定,重組真覈錶達質粒ZmCPK12-5N構建成功.製備酵母感受態,將重組質粒電擊轉人酵母中,酵母菌落PCR結果顯示電擊轉化成功.[結論]成功構建瞭玉米mCPK12基因真覈錶達載體,併且成功轉化瞭酵母.
[목적]CDPK시일류의뢰우Ca2+이불의뢰CaM급린지적단백격매,혹류개조소결구역적단백격매,시식물화저등동물소특유.연구위옥미CDPK기인가족재항역중적작용제공기출.[방법]구건옥미ZmCPK12기인진핵표체재체시료해옥미중해기인공능적중요도경지일.실험이용RT - PCR기술확증득도대소위1 533 bp적옥미ZmCPK12기인,경한제성내절매SalI화NotI진행소화,장목적기인여진핵표체질립pREP -5N련접,획득중조진핵표체질립ZmCPK12 - 5N.[결과]통과균락PCR、쌍매절급측서등방법진행감정,중조진핵표체질립ZmCPK12-5N구건성공.제비효모감수태,장중조질립전격전인효모중,효모균락PCR결과현시전격전화성공.[결론]성공구건료옥미mCPK12기인진핵표체재체,병차성공전화료효모.
