南京农业大学学报
南京農業大學學報
남경농업대학학보
JOURNAL OF NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY
2010年
4期
81-86
,共6页
齐立辉%郑新艳%冉婷婷%徐朗莱%王伟武
齊立輝%鄭新豔%冉婷婷%徐朗萊%王偉武
제립휘%정신염%염정정%서랑래%왕위무
草酰乙酸脱羧酶%Na+泵%酶纯化%生化特性
草酰乙痠脫羧酶%Na+泵%酶純化%生化特性
초선을산탈최매%Na+빙%매순화%생화특성
为深入了解沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶的生化特性及功能,将该酶基因克隆到表达载体中,转入大肠杆菌中诱导表达,表达产物经monomeric avidin-Sepharose亲和层析分离纯化,获得了纯的沙门氏菌草酰乙酸脱羧酶.结果表明:纯化后的草酰乙酸脱羧酶经SDS-PAGE检测,呈现3条蛋白谱带,相对分子质量分别为65×103、46×103、8.8×103左右;该酶不耐高温,50 ℃温浴1 h后活力几乎完全丧失;其最适pH为6.0左右;1 mmol·L-1Zn2+、0.5 mmol·L-1草酸和20 mmol·L-1丙酮酸几乎完全抑制该酶的活力,10～20 mmol·L-1NaCl对该酶有明显激活作用,但200～500 mmol·L-1的NaCl对该酶却有明显抑制作用.
為深入瞭解沙門氏菌草酰乙痠脫羧酶的生化特性及功能,將該酶基因剋隆到錶達載體中,轉入大腸桿菌中誘導錶達,錶達產物經monomeric avidin-Sepharose親和層析分離純化,穫得瞭純的沙門氏菌草酰乙痠脫羧酶.結果錶明:純化後的草酰乙痠脫羧酶經SDS-PAGE檢測,呈現3條蛋白譜帶,相對分子質量分彆為65×103、46×103、8.8×103左右;該酶不耐高溫,50 ℃溫浴1 h後活力幾乎完全喪失;其最適pH為6.0左右;1 mmol·L-1Zn2+、0.5 mmol·L-1草痠和20 mmol·L-1丙酮痠幾乎完全抑製該酶的活力,10～20 mmol·L-1NaCl對該酶有明顯激活作用,但200～500 mmol·L-1的NaCl對該酶卻有明顯抑製作用.
위심입료해사문씨균초선을산탈최매적생화특성급공능,장해매기인극륭도표체재체중,전입대장간균중유도표체,표체산물경monomeric avidin-Sepharose친화층석분리순화,획득료순적사문씨균초선을산탈최매.결과표명:순화후적초선을산탈최매경SDS-PAGE검측,정현3조단백보대,상대분자질량분별위65×103、46×103、8.8×103좌우;해매불내고온,50 ℃온욕1 h후활력궤호완전상실;기최괄pH위6.0좌우;1 mmol·L-1Zn2+、0.5 mmol·L-1초산화20 mmol·L-1병동산궤호완전억제해매적활력,10～20 mmol·L-1NaCl대해매유명현격활작용,단200～500 mmol·L-1적NaCl대해매각유명현억제작용.
