生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2011年
1期
77-80
,共4页
高雅红%王进忠%李明福%李桂芬
高雅紅%王進忠%李明福%李桂芬
고아홍%왕진충%리명복%리계분
李痘病毒%荧光定量RT-PCR%TaqMan探针
李痘病毒%熒光定量RT-PCR%TaqMan探針
리두병독%형광정량RT-PCR%TaqMan탐침
目的:建立李痘病毒(PPV)特异、灵敏、快速的实时荧光定量RT-PCR检测方法,用于核果类种苗的健康评测及李痘病毒疫情监测.方法:根据PPV-D株系和PPV-M株系的外被蛋白(CP)基因保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,扩增全长CP基因片段,并将其克隆到pMD18-T载体上,构建质粒标准品,建立PPV的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行评估.结果:此荧光定量RT-PCR方法对PPV检测呈现高灵敏度和高特异性,与马铃薯Y病毒和马铃薯X病毒无交叉反应,最低检出限可达1.6×102拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.999 18.结论:建立了李痘病毒的荧光定量RT-PCR检测方法,可望应用于检验检疫部门对李痘病毒的快速检测.
目的:建立李痘病毒(PPV)特異、靈敏、快速的實時熒光定量RT-PCR檢測方法,用于覈果類種苗的健康評測及李痘病毒疫情鑑測.方法:根據PPV-D株繫和PPV-M株繫的外被蛋白(CP)基因保守序列,設計特異性引物和TaqMan探針,擴增全長CP基因片段,併將其剋隆到pMD18-T載體上,構建質粒標準品,建立PPV的實時熒光定量RT-PCR檢測方法,併對該方法的特異性、靈敏度和重複性進行評估.結果:此熒光定量RT-PCR方法對PPV檢測呈現高靈敏度和高特異性,與馬鈴藷Y病毒和馬鈴藷X病毒無交扠反應,最低檢齣限可達1.6×102拷貝/μL,標準麯線的相關繫數為0.999 18.結論:建立瞭李痘病毒的熒光定量RT-PCR檢測方法,可望應用于檢驗檢疫部門對李痘病毒的快速檢測.
목적:건립리두병독(PPV)특이、령민、쾌속적실시형광정량RT-PCR검측방법,용우핵과류충묘적건강평측급리두병독역정감측.방법:근거PPV-D주계화PPV-M주계적외피단백(CP)기인보수서렬,설계특이성인물화TaqMan탐침,확증전장CP기인편단,병장기극륭도pMD18-T재체상,구건질립표준품,건립PPV적실시형광정량RT-PCR검측방법,병대해방법적특이성、령민도화중복성진행평고.결과:차형광정량RT-PCR방법대PPV검측정현고령민도화고특이성,여마령서Y병독화마령서X병독무교차반응,최저검출한가체1.6×102고패/μL,표준곡선적상관계수위0.999 18.결론:건립료리두병독적형광정량RT-PCR검측방법,가망응용우검험검역부문대리두병독적쾌속검측.
