中国医学创新
中國醫學創新
중국의학창신
MEDICAL INNOVATION OF CHINA
2011年
19期
58-60
,共3页
臧泉红%陈昭日%张丽芹%戴淼%王春一%吕秀萍
臧泉紅%陳昭日%張麗芹%戴淼%王春一%呂秀萍
장천홍%진소일%장려근%대묘%왕춘일%려수평
卵巢癌肿瘤%Twist%RNA干扰%逆转耐药%凋亡
卵巢癌腫瘤%Twist%RNA榦擾%逆轉耐藥%凋亡
란소암종류%Twist%RNA간우%역전내약%조망
目的 探讨载体表达的小干扰RNA(siRNA)影响卵巢癌耐药细胞株Twist基因的表达、促进凋亡并逆转其阿霉素耐药的可行性.方法 体外构建Twist小发卡状RNA(shRNA)的表达质粒,脂质体法介导将其转染入SKOV3/ADM细胞.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Twist mRNA的表达;使用免疫细胞化学法(ICC)检测Twist蛋白的表达;使用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定各组细胞对阿霉素的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测其对卵巢癌细胞凋亡的影响.结果 Twist shRNA转染组细胞Twist mRNA 的表达与其他两组相比明显减弱,Twist蛋白表达明显下调,差异均有统计学意义(P<0.01);阿霉素敏感性比正常对照组提高了约2.5倍;流式细胞仪显示阿霉素作用24 h后,特异性转染组细胞周期分布发生明显改变,G0/G1期细胞比例增多,而S期细胞比例减少,凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 针对TWIST合成的siRNA能够有效地抑制TWIST mRNA和蛋白的表达,促进卵巢癌耐药细胞凋亡并能恢复其对阿霉素的敏感性.应用RNAi技术,能够逆转卵巢癌细胞对化疗药物的耐药性.
目的 探討載體錶達的小榦擾RNA(siRNA)影響卵巢癌耐藥細胞株Twist基因的錶達、促進凋亡併逆轉其阿黴素耐藥的可行性.方法 體外構建Twist小髮卡狀RNA(shRNA)的錶達質粒,脂質體法介導將其轉染入SKOV3/ADM細胞.採用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測Twist mRNA的錶達;使用免疫細胞化學法(ICC)檢測Twist蛋白的錶達;使用四甲基偶氮唑藍法(MTT)測定各組細胞對阿黴素的半數抑製濃度(IC50);流式細胞術檢測其對卵巢癌細胞凋亡的影響.結果 Twist shRNA轉染組細胞Twist mRNA 的錶達與其他兩組相比明顯減弱,Twist蛋白錶達明顯下調,差異均有統計學意義(P<0.01);阿黴素敏感性比正常對照組提高瞭約2.5倍;流式細胞儀顯示阿黴素作用24 h後,特異性轉染組細胞週期分佈髮生明顯改變,G0/G1期細胞比例增多,而S期細胞比例減少,凋亡率顯著升高,差異有統計學意義(P<0.05).結論 針對TWIST閤成的siRNA能夠有效地抑製TWIST mRNA和蛋白的錶達,促進卵巢癌耐藥細胞凋亡併能恢複其對阿黴素的敏感性.應用RNAi技術,能夠逆轉卵巢癌細胞對化療藥物的耐藥性.
목적 탐토재체표체적소간우RNA(siRNA)영향란소암내약세포주Twist기인적표체、촉진조망병역전기아매소내약적가행성.방법 체외구건Twist소발잡상RNA(shRNA)적표체질립,지질체법개도장기전염입SKOV3/ADM세포.채용역전록취합매련반응(RT-PCR)검측Twist mRNA적표체;사용면역세포화학법(ICC)검측Twist단백적표체;사용사갑기우담서람법(MTT)측정각조세포대아매소적반수억제농도(IC50);류식세포술검측기대란소암세포조망적영향.결과 Twist shRNA전염조세포Twist mRNA 적표체여기타량조상비명현감약,Twist단백표체명현하조,차이균유통계학의의(P<0.01);아매소민감성비정상대조조제고료약2.5배;류식세포의현시아매소작용24 h후,특이성전염조세포주기분포발생명현개변,G0/G1기세포비례증다,이S기세포비례감소,조망솔현저승고,차이유통계학의의(P<0.05).결론 침대TWIST합성적siRNA능구유효지억제TWIST mRNA화단백적표체,촉진란소암내약세포조망병능회복기대아매소적민감성.응용RNAi기술,능구역전란소암세포대화료약물적내약성.
