CAJ | 학술논문

目的:以尿酸酶为模型,考察在底物浓度高于酶米氏常数(Km)时用积分法测定酶活性(Vm)的可靠性. 方法:用293 nm光吸收记录尿酸酶反应曲线. 用以反应时间为自变量的积分速度方程,以尿酸酶Km为常数而本底为非线性参数拟合尿酸酶反应曲线,搜寻对应最好拟合的Vm. 结果:此积分法测定Vm主要受剩余底物浓度影响,本底基本没有干扰. 剩余底物低于2.5 μmol/L时用10～70 μmol/L起始底物所得Vm无差异. 用25和70 μmol/L起始底物浓度时初速度和Vm都与酶量呈正比. 在此两种底物浓度下积分法的下限相同,且与初速度法下限无明显差异. 但用积分法测定酶活性的上限明显高于初速度法,而且起始底物浓度越低则差异越显著. 结论:在积分法中使用以反应时间为自变量的积分速度方程拟合酶反应曲线,在高于Km的底物浓度下能可靠测定酶活性.
목적:이뇨산매위모형,고찰재저물농도고우매미씨상수(Km)시용적분법측정매활성(Vm)적가고성. 방법:용293 nm광흡수기록뇨산매반응곡선. 용이반응시간위자변량적적분속도방정,이뇨산매Km위상수이본저위비선성삼수의합뇨산매반응곡선,수심대응최호의합적Vm. 결과:차적분법측정Vm주요수잉여저물농도영향,본저기본몰유간우. 잉여저물저우2.5 μmol/L시용10～70 μmol/L기시저물소득Vm무차이. 용25화70 μmol/L기시저물농도시초속도화Vm도여매량정정비. 재차량충저물농도하적분법적하한상동,차여초속도법하한무명현차이. 단용적분법측정매활성적상한명현고우초속도법,이차기시저물농도월저칙차이월현저. 결론:재적분법중사용이반응시간위자변량적적분속도방정의합매반응곡선,재고우Km적저물농도하능가고측정매활성.