中华骨科杂志
中華骨科雜誌
중화골과잡지
CHINESE JOURNAL OF ORTHOPAEDICS
2001年
7期
417-420
,共4页
马庆军%党耕町%J Kim%K-L Paul Sung
馬慶軍%黨耕町%J Kim%K-L Paul Sung
마경군%당경정%J Kim%K-L Paul Sung
膝关节%侧副韧带%细胞培养%力学%遗传学技术
膝關節%側副韌帶%細胞培養%力學%遺傳學技術
슬관절%측부인대%세포배양%역학%유전학기술
目的用mRNA差异显示技术观察人膝关节内侧副韧带(medial collateral ligament, MCL)细胞在力学牵张下的mRNA表达变化.方法 MCL细胞置于Equi-Biaxial牵张装置中培养,生长达80%丰满后细胞饥饿24 h,实验组给予5%的牵张力刺激2 h,对照组不给予牵张刺激.刺激后立即提取细胞总RNA,用mRNA差异显示技术观察实验组与对照组在mRNA表达水平上的差异,将有差异的表达带回收、扩增、克隆并行Reverse Northern杂交,选出阳性克隆进行cDNA测序并与NCBI基因数据库进行对照分析.结果在实验组与对照组间找到6个阳性克隆基因,其中基因G2S3与Lambert-Eaton肌无力综合征抗原B基因的同源性达96%,其余5个基因的功能目前尚未得知.结论给予MCL细胞5%的牵张刺激后其mRNA表达发生变化;G2S3可能与神经-肌接头处乙酰胆碱传递的基因相关.
目的用mRNA差異顯示技術觀察人膝關節內側副韌帶(medial collateral ligament, MCL)細胞在力學牽張下的mRNA錶達變化.方法 MCL細胞置于Equi-Biaxial牽張裝置中培養,生長達80%豐滿後細胞饑餓24 h,實驗組給予5%的牽張力刺激2 h,對照組不給予牽張刺激.刺激後立即提取細胞總RNA,用mRNA差異顯示技術觀察實驗組與對照組在mRNA錶達水平上的差異,將有差異的錶達帶迴收、擴增、剋隆併行Reverse Northern雜交,選齣暘性剋隆進行cDNA測序併與NCBI基因數據庫進行對照分析.結果在實驗組與對照組間找到6箇暘性剋隆基因,其中基因G2S3與Lambert-Eaton肌無力綜閤徵抗原B基因的同源性達96%,其餘5箇基因的功能目前尚未得知.結論給予MCL細胞5%的牽張刺激後其mRNA錶達髮生變化;G2S3可能與神經-肌接頭處乙酰膽堿傳遞的基因相關.
목적용mRNA차이현시기술관찰인슬관절내측부인대(medial collateral ligament, MCL)세포재역학견장하적mRNA표체변화.방법 MCL세포치우Equi-Biaxial견장장치중배양,생장체80%봉만후세포기아24 h,실험조급여5%적견장력자격2 h,대조조불급여견장자격.자격후립즉제취세포총RNA,용mRNA차이현시기술관찰실험조여대조조재mRNA표체수평상적차이,장유차이적표체대회수、확증、극륭병행Reverse Northern잡교,선출양성극륭진행cDNA측서병여NCBI기인수거고진행대조분석.결과재실험조여대조조간조도6개양성극륭기인,기중기인G2S3여Lambert-Eaton기무력종합정항원B기인적동원성체96%,기여5개기인적공능목전상미득지.결론급여MCL세포5%적견장자격후기mRNA표체발생변화;G2S3가능여신경-기접두처을선담감전체적기인상관.
