生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2007年
1期
37-39
,共3页
吕凤香%沙伟%闫苗苗%李兵兵
呂鳳香%沙偉%閆苗苗%李兵兵
려봉향%사위%염묘묘%리병병
东亚砂藓RNA%提取方法%RT-PCR
東亞砂蘚RNA%提取方法%RT-PCR
동아사선RNA%제취방법%RT-PCR
方法:以东亚砂藓为材料,用CTAB法、热硼酸盐法和改良的SDS/酸酚法提取东亚砂藓总RNA,并采用3种方法进行沉淀,从提取RNA的纯度、完整性、产量、耗时和RT-PCR效果等分析确定适用于东亚砂藓总RNA提取的方法.结果:研究表明:CTAB法提取的RNA 28S rRNA明显缺失,泳道模糊不清,杂质多,热硼酸法和改良的SDS/酸酚法提取RNA 28S rRNA,18S rRNA条带清晰,OD260/OD280都在1.7以上,纯度高,但热硼酸法提取出的RNA有DNA污染,RNA的含量(15.68～35.2 μg.g-1)低于SDS/酸酚法提取RNA的含量(46.5～51.9 μg.g-1)3种沉淀方法比较认为无水乙醇配合LiCl沉淀RNA节省时间,反转录和RT-PCR效果好.结论:改良的SDS/酸酚法适合东亚砂藓RNA的提取.
方法:以東亞砂蘚為材料,用CTAB法、熱硼痠鹽法和改良的SDS/痠酚法提取東亞砂蘚總RNA,併採用3種方法進行沉澱,從提取RNA的純度、完整性、產量、耗時和RT-PCR效果等分析確定適用于東亞砂蘚總RNA提取的方法.結果:研究錶明:CTAB法提取的RNA 28S rRNA明顯缺失,泳道模糊不清,雜質多,熱硼痠法和改良的SDS/痠酚法提取RNA 28S rRNA,18S rRNA條帶清晰,OD260/OD280都在1.7以上,純度高,但熱硼痠法提取齣的RNA有DNA汙染,RNA的含量(15.68～35.2 μg.g-1)低于SDS/痠酚法提取RNA的含量(46.5～51.9 μg.g-1)3種沉澱方法比較認為無水乙醇配閤LiCl沉澱RNA節省時間,反轉錄和RT-PCR效果好.結論:改良的SDS/痠酚法適閤東亞砂蘚RNA的提取.
방법:이동아사선위재료,용CTAB법、열붕산염법화개량적SDS/산분법제취동아사선총RNA,병채용3충방법진행침정,종제취RNA적순도、완정성、산량、모시화RT-PCR효과등분석학정괄용우동아사선총RNA제취적방법.결과:연구표명:CTAB법제취적RNA 28S rRNA명현결실,영도모호불청,잡질다,열붕산법화개량적SDS/산분법제취RNA 28S rRNA,18S rRNA조대청석,OD260/OD280도재1.7이상,순도고,단열붕산법제취출적RNA유DNA오염,RNA적함량(15.68～35.2 μg.g-1)저우SDS/산분법제취RNA적함량(46.5～51.9 μg.g-1)3충침정방법비교인위무수을순배합LiCl침정RNA절성시간,반전록화RT-PCR효과호.결론:개량적SDS/산분법괄합동아사선RNA적제취.
