昆虫知识
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곤충지식
ENTOMOLOGICAL KNOWLEDGE
2007年
4期
505-508
,共4页
葛风伟%季荣%曾献春%王婷%王小平
葛風偉%季榮%曾獻春%王婷%王小平
갈풍위%계영%증헌춘%왕정%왕소평
随机扩增多态性DNA%基因组DNA%西伯利亚蝗%巴里坤地区
隨機擴增多態性DNA%基因組DNA%西伯利亞蝗%巴裏坤地區
수궤확증다태성DNA%기인조DNA%서백리아황%파리곤지구
以西伯利亚蝗Gomphocerus sibiricus(L.)为研究材料,利用改良的SDS法提取高质量的DNA,分别测试了dNTP浓度、镁离子浓度、Taq DNA聚合酶用量、模板DNA的量等因素对反应结果的影响.通过各因子的组合比较,建立了西伯利亚蝗RAPD优化体系:25μL PCR反应体系,10×buffer 2.5 μL;dNTP 0.24 mmol/L;MgCl2 2.0 mmol/L;Taq DNA聚合酶1 U;DNA模板45 ng;引物30 ng.扩增程序为:94℃预变性1 min 45 s、94℃变性30 s、35 ℃退火1 min 30 s、72℃延伸2 min,45个循环、72℃延伸10 min.结果表明,利用优化的反应条件进行西伯利亚蝗基因组DNA分析,实验有着良好的重复性和稳定性.
以西伯利亞蝗Gomphocerus sibiricus(L.)為研究材料,利用改良的SDS法提取高質量的DNA,分彆測試瞭dNTP濃度、鎂離子濃度、Taq DNA聚閤酶用量、模闆DNA的量等因素對反應結果的影響.通過各因子的組閤比較,建立瞭西伯利亞蝗RAPD優化體繫:25μL PCR反應體繫,10×buffer 2.5 μL;dNTP 0.24 mmol/L;MgCl2 2.0 mmol/L;Taq DNA聚閤酶1 U;DNA模闆45 ng;引物30 ng.擴增程序為:94℃預變性1 min 45 s、94℃變性30 s、35 ℃退火1 min 30 s、72℃延伸2 min,45箇循環、72℃延伸10 min.結果錶明,利用優化的反應條件進行西伯利亞蝗基因組DNA分析,實驗有著良好的重複性和穩定性.
이서백리아황Gomphocerus sibiricus(L.)위연구재료,이용개량적SDS법제취고질량적DNA,분별측시료dNTP농도、미리자농도、Taq DNA취합매용량、모판DNA적량등인소대반응결과적영향.통과각인자적조합비교,건립료서백리아황RAPD우화체계:25μL PCR반응체계,10×buffer 2.5 μL;dNTP 0.24 mmol/L;MgCl2 2.0 mmol/L;Taq DNA취합매1 U;DNA모판45 ng;인물30 ng.확증정서위:94℃예변성1 min 45 s、94℃변성30 s、35 ℃퇴화1 min 30 s、72℃연신2 min,45개순배、72℃연신10 min.결과표명,이용우화적반응조건진행서백리아황기인조DNA분석,실험유착량호적중복성화은정성.
