CAJ | 학술논문

根据其它植物PAL基因的保守区域,设计一对兼并引物,采用RT-PCR方法从国槐中克隆了一个长866 bp的PAL基因片段,命名为SjPAL.序列分析发现SjPAL多肽与其它植物的PAL氨基酸序列高度同源(87%以上),且包含与水稻和拟南芥的PAL类似的活性位点.系统进化树分析表明SjPAL与豆科植物的PAL亲缘关系较近.RT-PCR结果显示,SjPAL在根和茎的表达量约为叶中的3倍.利用反义RNA技术将SjPAL基因克隆至植物表达载体pBI121,构建了SjPAL反义RNA植物表达载体pBI121-PAL,通过根癌农杆菌EHA105将其导入拟南芥基因组,对获得的抗性植株进行PCR鉴定、Northern杂交分析、PAL活性分析以及总多酚含量和类黄酮含量分析.结果表明,该反义RNA已整合到拟南芥基因组中,转基因拟南芥的PAL基因表达量、单位材料PAL活性、总多酚含量和类黄酮含量均显著低于野生型对照.本研究为下一步利用该基因反义表达载体转化国槐,通过调节酚类物质含量提高其在再生体系中的生根能力提供了试验依据.
근거기타식물PAL기인적보수구역,설계일대겸병인물,채용RT-PCR방법종국괴중극륭료일개장866 bp적PAL기인편단,명명위SjPAL.서렬분석발현SjPAL다태여기타식물적PAL안기산서렬고도동원(87%이상),차포함여수도화의남개적PAL유사적활성위점.계통진화수분석표명SjPAL여두과식물적PAL친연관계교근.RT-PCR결과현시,SjPAL재근화경적표체량약위협중적3배.이용반의RNA기술장SjPAL기인극륭지식물표체재체pBI121,구건료SjPAL반의RNA식물표체재체pBI121-PAL,통과근암농간균EHA105장기도입의남개기인조,대획득적항성식주진행PCR감정、Northern잡교분석、PAL활성분석이급총다분함량화류황동함량분석.결과표명,해반의RNA이정합도의남개기인조중,전기인의남개적PAL기인표체량、단위재료PAL활성、총다분함량화류황동함량균현저저우야생형대조.본연구위하일보이용해기인반의표체재체전화국괴,통과조절분류물질함량제고기재재생체계중적생근능력제공료시험의거.