蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2008年
4期
619-626
,共8页
董久鸣%徐和平%何达%徐豫松
董久鳴%徐和平%何達%徐豫鬆
동구명%서화평%하체%서예송
钙网蛋白%蛋白质组%基因结构%家蚕
鈣網蛋白%蛋白質組%基因結構%傢蠶
개망단백%단백질조%기인결구%가잠
钙网蛋白(calreticulin, CRT)是内质网/肌浆网主要的Ca2+结合蛋白,在细胞功能的调节方面发挥重要作用.利用双向电泳技术及质谱技术研究家蚕脂肪体蛋白组的变化,通过分析检索蛋白质组数据,获得了钙结合蛋白的氨基酸序列.通过电子克隆、cDNA 3'末端快速扩增(3' rapid amplification of cDNA ends,3'RACE)方法克隆了家蚕钙网蛋白基因cDNA全长序列,命名为BmCRT (GenBank登录号:FJ360528).BmCRT基因cDNA全长1 705 bp,开放阅读框序列(ORF)长 1 197 bp,编码398个氨基酸.氨基酸序列分析显示,BmCRT与其它物种的CRT都具有保守的N-结构域、脯氨酸富集结构域和C-端结构域.BmCRT 基因组结构分析表明:该基因由7个外显子和6个内含子组成.分析BmCRT mRNA 在不同发育时期的表达变化显示,该基因在家蚕幼虫眠期的mRNA表达量比食桑期高,而在4龄和5龄食桑期mRNA表达量没有随着生长变化而变化.
鈣網蛋白(calreticulin, CRT)是內質網/肌漿網主要的Ca2+結閤蛋白,在細胞功能的調節方麵髮揮重要作用.利用雙嚮電泳技術及質譜技術研究傢蠶脂肪體蛋白組的變化,通過分析檢索蛋白質組數據,穫得瞭鈣結閤蛋白的氨基痠序列.通過電子剋隆、cDNA 3'末耑快速擴增(3' rapid amplification of cDNA ends,3'RACE)方法剋隆瞭傢蠶鈣網蛋白基因cDNA全長序列,命名為BmCRT (GenBank登錄號:FJ360528).BmCRT基因cDNA全長1 705 bp,開放閱讀框序列(ORF)長 1 197 bp,編碼398箇氨基痠.氨基痠序列分析顯示,BmCRT與其它物種的CRT都具有保守的N-結構域、脯氨痠富集結構域和C-耑結構域.BmCRT 基因組結構分析錶明:該基因由7箇外顯子和6箇內含子組成.分析BmCRT mRNA 在不同髮育時期的錶達變化顯示,該基因在傢蠶幼蟲眠期的mRNA錶達量比食桑期高,而在4齡和5齡食桑期mRNA錶達量沒有隨著生長變化而變化.
개망단백(calreticulin, CRT)시내질망/기장망주요적Ca2+결합단백,재세포공능적조절방면발휘중요작용.이용쌍향전영기술급질보기술연구가잠지방체단백조적변화,통과분석검색단백질조수거,획득료개결합단백적안기산서렬.통과전자극륭、cDNA 3'말단쾌속확증(3' rapid amplification of cDNA ends,3'RACE)방법극륭료가잠개망단백기인cDNA전장서렬,명명위BmCRT (GenBank등록호:FJ360528).BmCRT기인cDNA전장1 705 bp,개방열독광서렬(ORF)장 1 197 bp,편마398개안기산.안기산서렬분석현시,BmCRT여기타물충적CRT도구유보수적N-결구역、포안산부집결구역화C-단결구역.BmCRT 기인조결구분석표명:해기인유7개외현자화6개내함자조성.분석BmCRT mRNA 재불동발육시기적표체변화현시,해기인재가잠유충면기적mRNA표체량비식상기고,이재4령화5령식상기mRNA표체량몰유수착생장변화이변화.