浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大學學報（農業與生命科學版）
절강대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2009年
2期
147-152
,共6页
许尧兴%李艳丽%柳永%许少春%姚晓红
許堯興%李豔麗%柳永%許少春%姚曉紅
허요흥%리염려%류영%허소춘%요효홍
黑曲霉变种RM48%α-半乳糖苷酶%分离纯化%酶学性质
黑麯黴變種RM48%α-半乳糖苷酶%分離純化%酶學性質
흑곡매변충RM48%α-반유당감매%분리순화%매학성질
经硫酸铵沉淀、疏水柱层析和分子筛层析,从黑曲霉变种RM48(Aspergillus niger v.Tiegh RM48)固体发酵后的浸提液中分离纯化了α-半乳糖苷酶.SDS-PAGE分析表明,此酶蛋白的分子量约为108 kDa.酶学性质研究表明,该酶的最适反应温度是60℃,耐热温度为40℃:最适反应pH为4.5,在pH 3.0～6.0之间保持90%以上的酶活性;在实验的金属离子范围内,所有金属离子对黑曲霉变种RM48α-半乳糖苷酶均有抑制作用,其中Cu2+和Fe2+抑制作用最为显著,Li2+、Zn2+、Mn2+、K+、Na+、Ca2+,Mg2+和Co2+对酶活性有轻微的抑制作用.在pH 4.0和60℃反应条件下此酶的Km为7.37mm01·L-1,Vmax为5618 IU·mg-1·min-1.成熟酶蛋白N端序列为DEKAYSPCYY,与已报道的α-半乳糖苷酶蛋白无同源性.
經硫痠銨沉澱、疏水柱層析和分子篩層析,從黑麯黴變種RM48(Aspergillus niger v.Tiegh RM48)固體髮酵後的浸提液中分離純化瞭α-半乳糖苷酶.SDS-PAGE分析錶明,此酶蛋白的分子量約為108 kDa.酶學性質研究錶明,該酶的最適反應溫度是60℃,耐熱溫度為40℃:最適反應pH為4.5,在pH 3.0～6.0之間保持90%以上的酶活性;在實驗的金屬離子範圍內,所有金屬離子對黑麯黴變種RM48α-半乳糖苷酶均有抑製作用,其中Cu2+和Fe2+抑製作用最為顯著,Li2+、Zn2+、Mn2+、K+、Na+、Ca2+,Mg2+和Co2+對酶活性有輕微的抑製作用.在pH 4.0和60℃反應條件下此酶的Km為7.37mm01·L-1,Vmax為5618 IU·mg-1·min-1.成熟酶蛋白N耑序列為DEKAYSPCYY,與已報道的α-半乳糖苷酶蛋白無同源性.
경류산안침정、소수주층석화분자사층석,종흑곡매변충RM48(Aspergillus niger v.Tiegh RM48)고체발효후적침제액중분리순화료α-반유당감매.SDS-PAGE분석표명,차매단백적분자량약위108 kDa.매학성질연구표명,해매적최괄반응온도시60℃,내열온도위40℃:최괄반응pH위4.5,재pH 3.0～6.0지간보지90%이상적매활성;재실험적금속리자범위내,소유금속리자대흑곡매변충RM48α-반유당감매균유억제작용,기중Cu2+화Fe2+억제작용최위현저,Li2+、Zn2+、Mn2+、K+、Na+、Ca2+,Mg2+화Co2+대매활성유경미적억제작용.재pH 4.0화60℃반응조건하차매적Km위7.37mm01·L-1,Vmax위5618 IU·mg-1·min-1.성숙매단백N단서렬위DEKAYSPCYY,여이보도적α-반유당감매단백무동원성.
