中国现代神经疾病杂志
中國現代神經疾病雜誌
중국현대신경질병잡지
CHINESE JOURNAL OF CONTEMPORARY NEUROLOGY AND NEUROSURGERY
2009年
2期
159-163
,共5页
郭新宾%崔维韵%刘庆国%张建宁%刘丽
郭新賓%崔維韻%劉慶國%張建寧%劉麗
곽신빈%최유운%류경국%장건저%류려
干细胞%内皮,血管%细胞,培养的%细胞分离%细胞培养技术
榦細胞%內皮,血管%細胞,培養的%細胞分離%細胞培養技術
간세포%내피,혈관%세포,배양적%세포분리%세포배양기술
目的 探讨人外周血内皮祖细胞体外分离培养和诱导分化的实验方法,为其在神经系统疾病中的应用提供理论依据.方法 抽取健康成年男性志愿者外周血10ml,密度梯度离心获得单个核细胞,经体外培养后于倒置相差荧光显微镜下观察细胞生长情况及形念变化;免疫荧光染色榆测细胞表面标志物CD133、CD34和凝血囚子Ⅷ表达水平;流式细胞术检测CD133-FITC和CD34-PE双阳性细胞所占比例及CD34-PE单阳性细胞所占比例.结果 倒置相差荧光显微镜下观察,人外周血单个核细胞经体外培养至第2天时,呈贴壁生长;至第4～6天时细胞集落形成,集落周围有内皮样细胞,细胞质和细胞膜呈红色和绿色双色荧光,细胞核呈蓝色荧光,提示内皮祖细胞特异性吸附Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白和FITC标记的Ⅰ型荆豆凝集素,具有内皮细胞功能.免疫荧光染色CD133、CD34和凝血因子Ⅷ表达阳性;流式细胞术检测CD133-FTTC和CD34-PE双阳性细胞所占比例为38.30%,CD34-PE单阳性细胞所占比例为82.60%.结论 初步确立人外周血内皮祖细胞体外分离培养和诱导分化的实验方法,为内皮祖细胞的移植研究奠定了基础.
目的 探討人外週血內皮祖細胞體外分離培養和誘導分化的實驗方法,為其在神經繫統疾病中的應用提供理論依據.方法 抽取健康成年男性誌願者外週血10ml,密度梯度離心穫得單箇覈細胞,經體外培養後于倒置相差熒光顯微鏡下觀察細胞生長情況及形唸變化;免疫熒光染色榆測細胞錶麵標誌物CD133、CD34和凝血囚子Ⅷ錶達水平;流式細胞術檢測CD133-FITC和CD34-PE雙暘性細胞所佔比例及CD34-PE單暘性細胞所佔比例.結果 倒置相差熒光顯微鏡下觀察,人外週血單箇覈細胞經體外培養至第2天時,呈貼壁生長;至第4～6天時細胞集落形成,集落週圍有內皮樣細胞,細胞質和細胞膜呈紅色和綠色雙色熒光,細胞覈呈藍色熒光,提示內皮祖細胞特異性吸附Dil標記的乙酰化低密度脂蛋白和FITC標記的Ⅰ型荊豆凝集素,具有內皮細胞功能.免疫熒光染色CD133、CD34和凝血因子Ⅷ錶達暘性;流式細胞術檢測CD133-FTTC和CD34-PE雙暘性細胞所佔比例為38.30%,CD34-PE單暘性細胞所佔比例為82.60%.結論 初步確立人外週血內皮祖細胞體外分離培養和誘導分化的實驗方法,為內皮祖細胞的移植研究奠定瞭基礎.
목적 탐토인외주혈내피조세포체외분리배양화유도분화적실험방법,위기재신경계통질병중적응용제공이론의거.방법 추취건강성년남성지원자외주혈10ml,밀도제도리심획득단개핵세포,경체외배양후우도치상차형광현미경하관찰세포생장정황급형념변화;면역형광염색유측세포표면표지물CD133、CD34화응혈수자Ⅷ표체수평;류식세포술검측CD133-FITC화CD34-PE쌍양성세포소점비례급CD34-PE단양성세포소점비례.결과 도치상차형광현미경하관찰,인외주혈단개핵세포경체외배양지제2천시,정첩벽생장;지제4～6천시세포집락형성,집락주위유내피양세포,세포질화세포막정홍색화록색쌍색형광,세포핵정람색형광,제시내피조세포특이성흡부Dil표기적을선화저밀도지단백화FITC표기적Ⅰ형형두응집소,구유내피세포공능.면역형광염색CD133、CD34화응혈인자Ⅷ표체양성;류식세포술검측CD133-FTTC화CD34-PE쌍양성세포소점비례위38.30%,CD34-PE단양성세포소점비례위82.60%.결론 초보학립인외주혈내피조세포체외분리배양화유도분화적실험방법,위내피조세포적이식연구전정료기출.
