作物学报
作物學報
작물학보
ACTA AGRONOMICA SINICA
2011年
7期
1196-1204
,共9页
尹明智%官梅%肖钢%李栒%官春云
尹明智%官梅%肖鋼%李栒%官春雲
윤명지%관매%초강%리순%관춘운
DOF转录因子%AtDof1.7%拟南芥%RNA干扰载体%脂肪酸代谢途径
DOF轉錄因子%AtDof1.7%擬南芥%RNA榦擾載體%脂肪痠代謝途徑
DOF전록인자%AtDof1.7%의남개%RNA간우재체%지방산대사도경
DOF (DNA binding with one finger)转录因子是植物特有的转录因子家族,含有一个独特的富含Cys残基的单锌指DNA结合区域,在植物生长发育中参与多种生物学过程.本研究根据拟南芥AtDof1.77基因(GenBank登录号为AT1G51700)序列设计含有不同酶切位点的特异性扩增引物,以拟南芥总DNA为模板,扩增AtDof1.7基因片段,将AtDof1.7基因正向反向分别插入表达载体的相应位置,构建成AtDof1.7基因的RNA干扰载体pADOF1.利用改良的floral-dip方法将干扰载体pADOF1成功转入野生型拟南芥,经草甘膦抗性筛选和PCR检测获得5株阳性转基因植株.利用RT-PCR技术和气相色谱法分别分析了AtDof1.7基因的表达和种子脂肪酸组成,结果表明,5株转基因植株中AtDof1.7基因的表达量不同程度低于野生型植株,种子油酸含量明显上升,亚麻酸含量明显下降,说明AtDof1.7转录因子与拟南芥种子脂肪酸代谢途径有一定的关系,为进一步研究其在脂肪酸代谢过程中的调控作用以及在油菜中研究该类转录因子的功能奠定了基础.
DOF (DNA binding with one finger)轉錄因子是植物特有的轉錄因子傢族,含有一箇獨特的富含Cys殘基的單鋅指DNA結閤區域,在植物生長髮育中參與多種生物學過程.本研究根據擬南芥AtDof1.77基因(GenBank登錄號為AT1G51700)序列設計含有不同酶切位點的特異性擴增引物,以擬南芥總DNA為模闆,擴增AtDof1.7基因片段,將AtDof1.7基因正嚮反嚮分彆插入錶達載體的相應位置,構建成AtDof1.7基因的RNA榦擾載體pADOF1.利用改良的floral-dip方法將榦擾載體pADOF1成功轉入野生型擬南芥,經草甘膦抗性篩選和PCR檢測穫得5株暘性轉基因植株.利用RT-PCR技術和氣相色譜法分彆分析瞭AtDof1.7基因的錶達和種子脂肪痠組成,結果錶明,5株轉基因植株中AtDof1.7基因的錶達量不同程度低于野生型植株,種子油痠含量明顯上升,亞痳痠含量明顯下降,說明AtDof1.7轉錄因子與擬南芥種子脂肪痠代謝途徑有一定的關繫,為進一步研究其在脂肪痠代謝過程中的調控作用以及在油菜中研究該類轉錄因子的功能奠定瞭基礎.
DOF (DNA binding with one finger)전록인자시식물특유적전록인자가족,함유일개독특적부함Cys잔기적단자지DNA결합구역,재식물생장발육중삼여다충생물학과정.본연구근거의남개AtDof1.77기인(GenBank등록호위AT1G51700)서렬설계함유불동매절위점적특이성확증인물,이의남개총DNA위모판,확증AtDof1.7기인편단,장AtDof1.7기인정향반향분별삽입표체재체적상응위치,구건성AtDof1.7기인적RNA간우재체pADOF1.이용개량적floral-dip방법장간우재체pADOF1성공전입야생형의남개,경초감련항성사선화PCR검측획득5주양성전기인식주.이용RT-PCR기술화기상색보법분별분석료AtDof1.7기인적표체화충자지방산조성,결과표명,5주전기인식주중AtDof1.7기인적표체량불동정도저우야생형식주,충자유산함량명현상승,아마산함량명현하강,설명AtDof1.7전록인자여의남개충자지방산대사도경유일정적관계,위진일보연구기재지방산대사과정중적조공작용이급재유채중연구해류전록인자적공능전정료기출.
