生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
9期
102-107
,共6页
乌吉斯古冷%汤睿智%邢万金
烏吉斯古冷%湯睿智%邢萬金
오길사고랭%탕예지%형만금
Wistar大鼠%Pdia3%cDNA克隆%原核表达
Wistar大鼠%Pdia3%cDNA剋隆%原覈錶達
Wistar대서%Pdia3%cDNA극륭%원핵표체
哺乳动物的精卵融合是一个多分子参与的复杂过程,目前只鉴定出几种影响精卵融合的蛋白因子,对其分子机制还知之甚少.其中位于精子上的Pdja3具有二硫键异构酶活性,可能催化其他精卵融合相关蛋白的二硫键变化而参与精卵膜融合.克隆了Wistar大鼠的Pdia3 cDNA片段,长度为1 620 bp,其中编码区为1 518 bp.测序结果显示,编码区内有两个碱基与GenBank公布的大鼠Pdia3cDNA不同,分别为第147个密码子GAG(Glu)的第1位碱基和第410个密码子AAG(Lys)的第3位碱基,前者造成氨基酸替换,后者仅为多态性.此外,还在大肠杆菌中成功地表达并纯化了GST-Pdia3融合蛋白,为下一步研究大鼠Pdia3在体外影响精卵融合和与其它蛋白的相互作用奠定了基础.
哺乳動物的精卵融閤是一箇多分子參與的複雜過程,目前隻鑒定齣幾種影響精卵融閤的蛋白因子,對其分子機製還知之甚少.其中位于精子上的Pdja3具有二硫鍵異構酶活性,可能催化其他精卵融閤相關蛋白的二硫鍵變化而參與精卵膜融閤.剋隆瞭Wistar大鼠的Pdia3 cDNA片段,長度為1 620 bp,其中編碼區為1 518 bp.測序結果顯示,編碼區內有兩箇堿基與GenBank公佈的大鼠Pdia3cDNA不同,分彆為第147箇密碼子GAG(Glu)的第1位堿基和第410箇密碼子AAG(Lys)的第3位堿基,前者造成氨基痠替換,後者僅為多態性.此外,還在大腸桿菌中成功地錶達併純化瞭GST-Pdia3融閤蛋白,為下一步研究大鼠Pdia3在體外影響精卵融閤和與其它蛋白的相互作用奠定瞭基礎.
포유동물적정란융합시일개다분자삼여적복잡과정,목전지감정출궤충영향정란융합적단백인자,대기분자궤제환지지심소.기중위우정자상적Pdja3구유이류건이구매활성,가능최화기타정란융합상관단백적이류건변화이삼여정란막융합.극륭료Wistar대서적Pdia3 cDNA편단,장도위1 620 bp,기중편마구위1 518 bp.측서결과현시,편마구내유량개감기여GenBank공포적대서Pdia3cDNA불동,분별위제147개밀마자GAG(Glu)적제1위감기화제410개밀마자AAG(Lys)적제3위감기,전자조성안기산체환,후자부위다태성.차외,환재대장간균중성공지표체병순화료GST-Pdia3융합단백,위하일보연구대서Pdia3재체외영향정란융합화여기타단백적상호작용전정료기출.
