中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2012年
2期
142-145
,共4页
HIV-1%V1V2%真核表达
HIV-1%V1V2%真覈錶達
HIV-1%V1V2%진핵표체
目的:真核表达北美HIV-1分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2,并纯化、鉴定其生物活性,为血清学分析鉴别HIV-1感染病人抗体反应及性质提供实验基础.方法:本研究将HIV-1北美分离株BAL和中国分离株CNE1两种毒株的V1V2基因序列定向克隆到多系统表达载体pTriEx-3 Hygro vector(Merck & Co.,Inc.)中,构建了表达质粒,并将表达质粒瞬时转染293T细胞,144小时后收获上清液,经浓缩、纯化后,SDS-PAGE电泳,Western blot检测蛋白的表达,ELISA检测其与HIV-1阳性病人血清的反应性.结果:经SDS-PAGE电泳、Western blot、ELISA方法证实确实得到了有免疫反应活性的V1V2蛋白,从表观分子量判断,表达的V1V2蛋白被糖基化修饰.使用V1V2蛋白作为抗原,分析发现中国HIV-1阳性病人体内比较广泛的存在着V1V2的抗体,为血清学的分析奠定了实验基础.
目的:真覈錶達北美HIV-1分離株BAL和中國分離株CNE1兩種毒株的V1V2,併純化、鑒定其生物活性,為血清學分析鑒彆HIV-1感染病人抗體反應及性質提供實驗基礎.方法:本研究將HIV-1北美分離株BAL和中國分離株CNE1兩種毒株的V1V2基因序列定嚮剋隆到多繫統錶達載體pTriEx-3 Hygro vector(Merck & Co.,Inc.)中,構建瞭錶達質粒,併將錶達質粒瞬時轉染293T細胞,144小時後收穫上清液,經濃縮、純化後,SDS-PAGE電泳,Western blot檢測蛋白的錶達,ELISA檢測其與HIV-1暘性病人血清的反應性.結果:經SDS-PAGE電泳、Western blot、ELISA方法證實確實得到瞭有免疫反應活性的V1V2蛋白,從錶觀分子量判斷,錶達的V1V2蛋白被糖基化脩飾.使用V1V2蛋白作為抗原,分析髮現中國HIV-1暘性病人體內比較廣汎的存在著V1V2的抗體,為血清學的分析奠定瞭實驗基礎.
목적:진핵표체북미HIV-1분리주BAL화중국분리주CNE1량충독주적V1V2,병순화、감정기생물활성,위혈청학분석감별HIV-1감염병인항체반응급성질제공실험기출.방법:본연구장HIV-1북미분리주BAL화중국분리주CNE1량충독주적V1V2기인서렬정향극륭도다계통표체재체pTriEx-3 Hygro vector(Merck & Co.,Inc.)중,구건료표체질립,병장표체질립순시전염293T세포,144소시후수획상청액,경농축、순화후,SDS-PAGE전영,Western blot검측단백적표체,ELISA검측기여HIV-1양성병인혈청적반응성.결과:경SDS-PAGE전영、Western blot、ELISA방법증실학실득도료유면역반응활성적V1V2단백,종표관분자량판단,표체적V1V2단백피당기화수식.사용V1V2단백작위항원,분석발현중국HIV-1양성병인체내비교엄범적존재착V1V2적항체,위혈청학적분석전정료실험기출.
