CAJ | 학술논문

七鳃鳗(Lampetra japonica)和盲鳗(Hyperotreti)作为现存的无颌类脊椎动物的代表,其适应性免疫系统中的受体分子与哺乳动物的抗原受体分子不同,这种独特的受体分子称为可变淋巴细胞受体VLRs(Variable lymphocytereceptors).目前VLRs 分为3 类,分别是VLRA、VLRB、VLRC,而VLRB 由七鳃鳗类B 淋巴细胞产生,是其体液免疫中主要成分,与IgM 结构和功能类似.文章对日本七鳃鳗VLRB 基因保守的C 末端进行克隆、原核表达和重组蛋白纯化后,免疫Balb/c 小鼠,通过细胞融合及间接酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)筛选技术得到针对VLRB 保守区的单克隆抗体细胞株.将杂交瘤细胞接种小鼠腹腔得到大量的单抗腹水,经Protein G 亲和纯化后的单抗进行ELISA 与Western blotting 检测.经ELISA 检测抗体效价为 1:40000.Western blotting 结果显示该单克隆抗体能够特异的检测重组VLRB 蛋白及七鳃鳗血清中分泌型VLRB.流式细胞实验证明该单抗能特异识别七鳃鳗类淋巴细胞表面表达的膜型VLRB.VLRB 单克隆抗体的成功制备和建株,为研究日本七鳃鳗基于VLR 的适应性免疫系统提供了重要的工具.
칠새만(Lampetra japonica)화맹만(Hyperotreti)작위현존적무합류척추동물적대표,기괄응성면역계통중적수체분자여포유동물적항원수체분자불동,저충독특적수체분자칭위가변림파세포수체VLRs(Variable lymphocytereceptors).목전VLRs 분위3 류,분별시VLRA、VLRB、VLRC,이VLRB 유칠새만류B 림파세포산생,시기체액면역중주요성분,여IgM 결구화공능유사.문장대일본칠새만VLRB 기인보수적C 말단진행극륭、원핵표체화중조단백순화후,면역Balb/c 소서,통과세포융합급간접매련면역흡부실험(Enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)사선기술득도침대VLRB 보수구적단극륭항체세포주.장잡교류세포접충소서복강득도대량적단항복수,경Protein G 친화순화후적단항진행ELISA 여Western blotting 검측.경ELISA 검측항체효개위 1:40000.Western blotting 결과현시해단극륭항체능구특이적검측중조VLRB 단백급칠새만혈청중분비형VLRB.류식세포실험증명해단항능특이식별칠새만류림파세포표면표체적막형VLRB.VLRB 단극륭항체적성공제비화건주,위연구일본칠새만기우VLR 적괄응성면역계통제공료중요적공구.