畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
2期
324-328
,共5页
吴德芹%颜晨%刘文华%温建新%邹玲%任慧英
吳德芹%顏晨%劉文華%溫建新%鄒玲%任慧英
오덕근%안신%류문화%온건신%추령%임혜영
多价噬菌体%尾丝蛋白%原核表达%多克隆抗体%宿主识别
多價噬菌體%尾絲蛋白%原覈錶達%多剋隆抗體%宿主識彆
다개서균체%미사단백%원핵표체%다극륭항체%숙주식별
为研究大肠杆菌多价噬菌体Bp7的尾丝蛋白gp37在噬菌体宿主识别中的作用,通过PCR扩增噬菌体Bp7尾丝蛋白gp37的C末端基因,构建原核重组表达质粒pGEX-6p-1-gp37,并转化大肠杆菌BL-21,IPTG诱导表达.以鉴定正确的融合表达蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,并检测抗血清对噬菌体增殖作用的影响.结果显示:经SDS-PAGE及Western blot鉴定证实得到含有GST标签67 ku的融合表达蛋白；抗Bp7尾丝蛋白gp37的抗血清可明显抑制噬菌体Bp3、Bp7的增殖(P＜0.05),对噬菌体Bp2、Bp5、Bp6的增殖具有抑制作用,但差异不显著(P＜0.05),该抗血清对噬菌体Bp4的增殖反而具有促进作用.试验结果证实gp37参与噬菌体Bp7的宿主识别.
為研究大腸桿菌多價噬菌體Bp7的尾絲蛋白gp37在噬菌體宿主識彆中的作用,通過PCR擴增噬菌體Bp7尾絲蛋白gp37的C末耑基因,構建原覈重組錶達質粒pGEX-6p-1-gp37,併轉化大腸桿菌BL-21,IPTG誘導錶達.以鑒定正確的融閤錶達蛋白免疫傢兔,製備多剋隆抗體,併檢測抗血清對噬菌體增殖作用的影響.結果顯示:經SDS-PAGE及Western blot鑒定證實得到含有GST標籤67 ku的融閤錶達蛋白；抗Bp7尾絲蛋白gp37的抗血清可明顯抑製噬菌體Bp3、Bp7的增殖(P＜0.05),對噬菌體Bp2、Bp5、Bp6的增殖具有抑製作用,但差異不顯著(P＜0.05),該抗血清對噬菌體Bp4的增殖反而具有促進作用.試驗結果證實gp37參與噬菌體Bp7的宿主識彆.
위연구대장간균다개서균체Bp7적미사단백gp37재서균체숙주식별중적작용,통과PCR확증서균체Bp7미사단백gp37적C말단기인,구건원핵중조표체질립pGEX-6p-1-gp37,병전화대장간균BL-21,IPTG유도표체.이감정정학적융합표체단백면역가토,제비다극륭항체,병검측항혈청대서균체증식작용적영향.결과현시:경SDS-PAGE급Western blot감정증실득도함유GST표첨67 ku적융합표체단백；항Bp7미사단백gp37적항혈청가명현억제서균체Bp3、Bp7적증식(P＜0.05),대서균체Bp2、Bp5、Bp6적증식구유억제작용,단차이불현저(P＜0.05),해항혈청대서균체Bp4적증식반이구유촉진작용.시험결과증실gp37삼여서균체Bp7적숙주식별.
