中国农业科技导报
中國農業科技導報
중국농업과기도보
REVIEW OF CHINA AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY
2012年
4期
55-60
,共6页
拟南芥%光系统Ⅱ%HCF243%D1蛋白%调控
擬南芥%光繫統Ⅱ%HCF243%D1蛋白%調控
의남개%광계통Ⅱ%HCF243%D1단백%조공
核基因编码的调控因子在光系统Ⅱ( PSⅡ)的组装过程中起着关键的调控或辅助作用.已有研究证明,HCF243蛋白是一个重要的核基因编码的调控因子,推测它可能作为一个辅因子通过与D1蛋白的直接相互作用来维持后者在PSⅡ蛋白复合物中的稳定.为了探究HCF243蛋白在光抑制条件下在PSⅡ核心亚基尤其D1蛋白周转过程中的作用机制,首先利用TAIL-PCR的方法鉴定了hcf243突变体T-DNA的插入位点,并通过半定量RT-PCR对该基因(At3g15095)进行了表达模式分析,发现其表达量在叶中最高并随发育阶段逐渐上调,不同胁迫条件下的表达量也有变化.利用体内蛋白质同位素标记实验,发现hcf243突变体中D1蛋白组装到PSⅡ复合体中的速度明显低于野生型；进一步通过蛋白免疫印记分析证实,在光抑制条件下,相比野生型,hcf243突变体中PSⅡ复合物核心亚基D1降解速度显著加快,可能是造成PSⅡ复合体组装速率降低的原因.因此,通过上述实验推测HCF243蛋白作为一个辅因子,在PSⅡ反应中心D1蛋白的周转尤其降解过程中起着关键的调控作用.
覈基因編碼的調控因子在光繫統Ⅱ( PSⅡ)的組裝過程中起著關鍵的調控或輔助作用.已有研究證明,HCF243蛋白是一箇重要的覈基因編碼的調控因子,推測它可能作為一箇輔因子通過與D1蛋白的直接相互作用來維持後者在PSⅡ蛋白複閤物中的穩定.為瞭探究HCF243蛋白在光抑製條件下在PSⅡ覈心亞基尤其D1蛋白週轉過程中的作用機製,首先利用TAIL-PCR的方法鑒定瞭hcf243突變體T-DNA的插入位點,併通過半定量RT-PCR對該基因(At3g15095)進行瞭錶達模式分析,髮現其錶達量在葉中最高併隨髮育階段逐漸上調,不同脅迫條件下的錶達量也有變化.利用體內蛋白質同位素標記實驗,髮現hcf243突變體中D1蛋白組裝到PSⅡ複閤體中的速度明顯低于野生型；進一步通過蛋白免疫印記分析證實,在光抑製條件下,相比野生型,hcf243突變體中PSⅡ複閤物覈心亞基D1降解速度顯著加快,可能是造成PSⅡ複閤體組裝速率降低的原因.因此,通過上述實驗推測HCF243蛋白作為一箇輔因子,在PSⅡ反應中心D1蛋白的週轉尤其降解過程中起著關鍵的調控作用.
핵기인편마적조공인자재광계통Ⅱ( PSⅡ)적조장과정중기착관건적조공혹보조작용.이유연구증명,HCF243단백시일개중요적핵기인편마적조공인자,추측타가능작위일개보인자통과여D1단백적직접상호작용래유지후자재PSⅡ단백복합물중적은정.위료탐구HCF243단백재광억제조건하재PSⅡ핵심아기우기D1단백주전과정중적작용궤제,수선이용TAIL-PCR적방법감정료hcf243돌변체T-DNA적삽입위점,병통과반정량RT-PCR대해기인(At3g15095)진행료표체모식분석,발현기표체량재협중최고병수발육계단축점상조,불동협박조건하적표체량야유변화.이용체내단백질동위소표기실험,발현hcf243돌변체중D1단백조장도PSⅡ복합체중적속도명현저우야생형；진일보통과단백면역인기분석증실,재광억제조건하,상비야생형,hcf243돌변체중PSⅡ복합물핵심아기D1강해속도현저가쾌,가능시조성PSⅡ복합체조장속솔강저적원인.인차,통과상술실험추측HCF243단백작위일개보인자,재PSⅡ반응중심D1단백적주전우기강해과정중기착관건적조공작용.
