生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2005年
5期
518-521
,共4页
条斑紫菜%藻红蛋白%提取%纯化
條斑紫菜%藻紅蛋白%提取%純化
조반자채%조홍단백%제취%순화
对条斑紫菜叶状体R-藻红蛋白提纯方法进行了研究和分析.首先分别采用冻融法、化学试剂法、溶胀法等单一及组合细胞破碎方法对条斑紫菜细胞进行破碎,结果表明溶胀+组织捣碎法效果最佳.其次用25%~60%饱和度范围内的硫酸铵沉淀法粗提藻红蛋白,发现25%~45%硫酸铵分步沉淀法效果最好,再经结晶法盐析纯度(D565nm/D280nm)达到2.088.盐析液用Sephadex G-25层析柱脱盐,再经羟基磷灰石(HA)柱层析,纯度可达到4.98.R-藻红蛋白的最大吸收峰在565 nm,其室温荧光发射峰为578 nm.SDS-PAGE结果显示,R-藻红蛋白可分为α、β两个亚基,Mr分别为17.0×103和19.0×103.
對條斑紫菜葉狀體R-藻紅蛋白提純方法進行瞭研究和分析.首先分彆採用凍融法、化學試劑法、溶脹法等單一及組閤細胞破碎方法對條斑紫菜細胞進行破碎,結果錶明溶脹+組織擣碎法效果最佳.其次用25%~60%飽和度範圍內的硫痠銨沉澱法粗提藻紅蛋白,髮現25%~45%硫痠銨分步沉澱法效果最好,再經結晶法鹽析純度(D565nm/D280nm)達到2.088.鹽析液用Sephadex G-25層析柱脫鹽,再經羥基燐灰石(HA)柱層析,純度可達到4.98.R-藻紅蛋白的最大吸收峰在565 nm,其室溫熒光髮射峰為578 nm.SDS-PAGE結果顯示,R-藻紅蛋白可分為α、β兩箇亞基,Mr分彆為17.0×103和19.0×103.
대조반자채협상체R-조홍단백제순방법진행료연구화분석.수선분별채용동융법、화학시제법、용창법등단일급조합세포파쇄방법대조반자채세포진행파쇄,결과표명용창+조직도쇄법효과최가.기차용25%~60%포화도범위내적류산안침정법조제조홍단백,발현25%~45%류산안분보침정법효과최호,재경결정법염석순도(D565nm/D280nm)체도2.088.염석액용Sephadex G-25층석주탈염,재경간기린회석(HA)주층석,순도가체도4.98.R-조홍단백적최대흡수봉재565 nm,기실온형광발사봉위578 nm.SDS-PAGE결과현시,R-조홍단백가분위α、β량개아기,Mr분별위17.0×103화19.0×103.