CAJ | 학술논문

目的应用载体介导的RNA干扰技术,特异地干扰重组CHO细胞中乙型肝炎病毒s基因的表达.方法设计两段靶向HBV s基因的特异性siRNA,合成两对64nt寡核苷酸,插入载体H1启动子下游,构建表达干扰性发夹状RNA(Short hairpin RNA,shRNA)的载体pHs-9和pHs-170,转染重组CHO细胞(该CHO细胞整合了HBV s基因,可稳定表达s抗原),用ELISA法检测HBsAg的表达.结果pHs-9和pHs-170转染重组CHO细胞后24～120 h,在细胞培养上清中检测到HBsAg表达降低,抑制率均达到70%左右.结论pHs-9和pHs-170已成功地表达了发夹状siRNA,并抑制了重组CHO细胞中HBsAg的表达.
목적응용재체개도적RNA간우기술,특이지간우중조CHO세포중을형간염병독s기인적표체.방법설계량단파향HBV s기인적특이성siRNA,합성량대64nt과핵감산,삽입재체H1계동자하유,구건표체간우성발협상RNA(Short hairpin RNA,shRNA)적재체pHs-9화pHs-170,전염중조CHO세포(해CHO세포정합료HBV s기인,가은정표체s항원),용ELISA법검측HBsAg적표체.결과pHs-9화pHs-170전염중조CHO세포후24～120 h,재세포배양상청중검측도HBsAg표체강저,억제솔균체도70%좌우.결론pHs-9화pHs-170이성공지표체료발협상siRNA,병억제료중조CHO세포중HBsAg적표체.