中华耳科学杂志
中華耳科學雜誌
중화이과학잡지
CHINESE JOURNAL OF OTOLOGY
2008年
2期
209-215
,共7页
韩维举%史晓瑞%Alfred NUTTALL
韓維舉%史曉瑞%Alfred NUTTALL
한유거%사효서%Alfred NUTTALL
噪声%外毛细胞%凋亡诱导因子%单链DNA%核酸内切酶G
譟聲%外毛細胞%凋亡誘導因子%單鏈DNA%覈痠內切酶G
조성%외모세포%조망유도인자%단련DNA%핵산내절매G
目的 观察噪声损伤后耳蜗外毛细胞内单链DNA和EndoG的变化,探讨耳蜗外毛细胞的死亡机制.方法 豚鼠随机分为噪声暴露组、MNNG耳蜗灌流组和对照组(每组各12只);小鼠随机分为噪声暴露组和对照组(每组12只).分离解剖耳蜗后,用碘化丙啶(PI)染色细胞核、Pholloidin染色F-actin,免疫荧光抗体分别染色单链DNA(ssDNA)、核酸内切酶G(Endonuclease G EndoG)和凋亡诱导因子(Apoptosis inducing factors,AIF),制备耳蜗铺片,激光共聚焦显微镜下观察凋亡和坏死毛细胞内的荧光信号变化.结果 (1)暴露于120 dBSPL的白噪声环境中每天4小时,连续2天后引起豚鼠和小鼠耳蜗外毛细胞凋亡时,其细胞核内产生ssDNA,而在正常细胞内没有三ssDNA;(2)在正常情况下,EndoG分布于耳蜗毛细胞的细胞核外,在暴露于上述噪声后发生凋亡和坏死的豚鼠耳蜗外毛细胞中.EndoG从细胞核外转移到细胞核内,细胞核中的EndoG显著增加;(3)豚鼠耳蜗外淋巴灌流烷化剂MNNG后发生耳蜗外毛细胞凋亡和坏死,在凋亡和坏死的耳蜗外毛细胞中,AIF自线粒体转移到细胞核,其变化与噪声损伤引起耳蜗外毛细胞凋亡和坏死时一致.结论 噪声刺激或烷化剂MNNG灌流后,造成耳蜗外毛细胞DNA损伤,产生ssDNA,引起AIF和EndoG自线粒体释放,激活Caspase-3,AIF和EndoG进一步向细胞核转移,最终使细胞核内的DNA降解,导致耳蜗毛细胞的死亡.
目的 觀察譟聲損傷後耳蝸外毛細胞內單鏈DNA和EndoG的變化,探討耳蝸外毛細胞的死亡機製.方法 豚鼠隨機分為譟聲暴露組、MNNG耳蝸灌流組和對照組(每組各12隻);小鼠隨機分為譟聲暴露組和對照組(每組12隻).分離解剖耳蝸後,用碘化丙啶(PI)染色細胞覈、Pholloidin染色F-actin,免疫熒光抗體分彆染色單鏈DNA(ssDNA)、覈痠內切酶G(Endonuclease G EndoG)和凋亡誘導因子(Apoptosis inducing factors,AIF),製備耳蝸鋪片,激光共聚焦顯微鏡下觀察凋亡和壞死毛細胞內的熒光信號變化.結果 (1)暴露于120 dBSPL的白譟聲環境中每天4小時,連續2天後引起豚鼠和小鼠耳蝸外毛細胞凋亡時,其細胞覈內產生ssDNA,而在正常細胞內沒有三ssDNA;(2)在正常情況下,EndoG分佈于耳蝸毛細胞的細胞覈外,在暴露于上述譟聲後髮生凋亡和壞死的豚鼠耳蝸外毛細胞中.EndoG從細胞覈外轉移到細胞覈內,細胞覈中的EndoG顯著增加;(3)豚鼠耳蝸外淋巴灌流烷化劑MNNG後髮生耳蝸外毛細胞凋亡和壞死,在凋亡和壞死的耳蝸外毛細胞中,AIF自線粒體轉移到細胞覈,其變化與譟聲損傷引起耳蝸外毛細胞凋亡和壞死時一緻.結論 譟聲刺激或烷化劑MNNG灌流後,造成耳蝸外毛細胞DNA損傷,產生ssDNA,引起AIF和EndoG自線粒體釋放,激活Caspase-3,AIF和EndoG進一步嚮細胞覈轉移,最終使細胞覈內的DNA降解,導緻耳蝸毛細胞的死亡.
목적 관찰조성손상후이와외모세포내단련DNA화EndoG적변화,탐토이와외모세포적사망궤제.방법 돈서수궤분위조성폭로조、MNNG이와관류조화대조조(매조각12지);소서수궤분위조성폭로조화대조조(매조12지).분리해부이와후,용전화병정(PI)염색세포핵、Pholloidin염색F-actin,면역형광항체분별염색단련DNA(ssDNA)、핵산내절매G(Endonuclease G EndoG)화조망유도인자(Apoptosis inducing factors,AIF),제비이와포편,격광공취초현미경하관찰조망화배사모세포내적형광신호변화.결과 (1)폭로우120 dBSPL적백조성배경중매천4소시,련속2천후인기돈서화소서이와외모세포조망시,기세포핵내산생ssDNA,이재정상세포내몰유삼ssDNA;(2)재정상정황하,EndoG분포우이와모세포적세포핵외,재폭로우상술조성후발생조망화배사적돈서이와외모세포중.EndoG종세포핵외전이도세포핵내,세포핵중적EndoG현저증가;(3)돈서이와외림파관류완화제MNNG후발생이와외모세포조망화배사,재조망화배사적이와외모세포중,AIF자선립체전이도세포핵,기변화여조성손상인기이와외모세포조망화배사시일치.결론 조성자격혹완화제MNNG관류후,조성이와외모세포DNA손상,산생ssDNA,인기AIF화EndoG자선립체석방,격활Caspase-3,AIF화EndoG진일보향세포핵전이,최종사세포핵내적DNA강해,도치이와모세포적사망.
