中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
6期
457-459
,共3页
朱可彤%杜娟%王小丹%郭博%孔维%于湘晖
硃可彤%杜娟%王小丹%郭博%孔維%于湘暉
주가동%두연%왕소단%곽박%공유%우상휘
人类免疫缺陷病毒1型%病毒感染性因子%基因克隆%原核表达
人類免疫缺陷病毒1型%病毒感染性因子%基因剋隆%原覈錶達
인류면역결함병독1형%병독감염성인자%기인극륭%원핵표체
目的 克隆HIV-1 Vif基因编码区序列,并在原核细胞中表达.方法 构建原核表达载体pMRI,将Vif基因序列克隆至该载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,菌体裂解后获得特异性表达蛋白,用组氨酸标签特异性亲和树脂分离纯化该蛋白,并经SDS-PAGE及Western blot鉴定.结果 表达质粒pMRI-Vif经双酶切,可见约600 bp的Vif基因片段,测序结果 证明质粒构建正确.在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达了可溶性Vif蛋白,纯化后经凝胶自动扫捕分析,纯度达85%以上,蛋白浓度约为1 g/L.纯化产物具有良好的抗原特异性.结论 在大肠杆菌中高效表达了可溶性Vif蛋白.
目的 剋隆HIV-1 Vif基因編碼區序列,併在原覈細胞中錶達.方法 構建原覈錶達載體pMRI,將Vif基因序列剋隆至該載體中,轉化大腸桿菌BL21(DE3),經IPTG誘導,菌體裂解後穫得特異性錶達蛋白,用組氨痠標籤特異性親和樹脂分離純化該蛋白,併經SDS-PAGE及Western blot鑒定.結果 錶達質粒pMRI-Vif經雙酶切,可見約600 bp的Vif基因片段,測序結果 證明質粒構建正確.在大腸桿菌BL21(DE3)中高效錶達瞭可溶性Vif蛋白,純化後經凝膠自動掃捕分析,純度達85%以上,蛋白濃度約為1 g/L.純化產物具有良好的抗原特異性.結論 在大腸桿菌中高效錶達瞭可溶性Vif蛋白.
목적 극륭HIV-1 Vif기인편마구서렬,병재원핵세포중표체.방법 구건원핵표체재체pMRI,장Vif기인서렬극륭지해재체중,전화대장간균BL21(DE3),경IPTG유도,균체렬해후획득특이성표체단백,용조안산표첨특이성친화수지분리순화해단백,병경SDS-PAGE급Western blot감정.결과 표체질립pMRI-Vif경쌍매절,가견약600 bp적Vif기인편단,측서결과 증명질립구건정학.재대장간균BL21(DE3)중고효표체료가용성Vif단백,순화후경응효자동소포분석,순도체85%이상,단백농도약위1 g/L.순화산물구유량호적항원특이성.결론 재대장간균중고효표체료가용성Vif단백.
