畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2009年
6期
818-823
,共6页
盛宏霞%吴庆侠%靳亚平%秦新喜%董海龙
盛宏霞%吳慶俠%靳亞平%秦新喜%董海龍
성굉하%오경협%근아평%진신희%동해룡
山羊%子宫内膜基质细胞%永生化细胞
山羊%子宮內膜基質細胞%永生化細胞
산양%자궁내막기질세포%영생화세포
将真核表达质粒pCI-neo-hTERT通过DNA转染技术导入山羊子宫内膜基质细胞(ESCs),筛选稳定转染的细胞克隆,进行表型鉴定、生长特性及E2、P4等性腺激素的反应性测定.结果,传至2代的山羊ESCs经转染pCI-neo-hTERT,G418筛选2～3周后,抗性克隆形成,滤纸片法转移,扩增并连续培养,共获得5个细胞克隆,扩大培养后的细胞呈典型的长梭形和三角形,相互平行排列成束,与原代培养形态一致.转染后细胞有较高的端粒酶活性,细胞增殖加速,传代时间缩短,传至50代仍稳定增殖.波形蛋白枪测阳性,角蛋白检测阴性,具有转染前山羊子宫内膜基质细胞特性.雌激素(100 nmol·L-1)和少量孕激素(10 nmol·L-1)对转染后基质细胞增殖有促进作用.获得了永生化的ESCs,为子宫内膜细胞体外研究奠定了基础.
將真覈錶達質粒pCI-neo-hTERT通過DNA轉染技術導入山羊子宮內膜基質細胞(ESCs),篩選穩定轉染的細胞剋隆,進行錶型鑒定、生長特性及E2、P4等性腺激素的反應性測定.結果,傳至2代的山羊ESCs經轉染pCI-neo-hTERT,G418篩選2～3週後,抗性剋隆形成,濾紙片法轉移,擴增併連續培養,共穫得5箇細胞剋隆,擴大培養後的細胞呈典型的長梭形和三角形,相互平行排列成束,與原代培養形態一緻.轉染後細胞有較高的耑粒酶活性,細胞增殖加速,傳代時間縮短,傳至50代仍穩定增殖.波形蛋白鎗測暘性,角蛋白檢測陰性,具有轉染前山羊子宮內膜基質細胞特性.雌激素(100 nmol·L-1)和少量孕激素(10 nmol·L-1)對轉染後基質細胞增殖有促進作用.穫得瞭永生化的ESCs,為子宮內膜細胞體外研究奠定瞭基礎.
장진핵표체질립pCI-neo-hTERT통과DNA전염기술도입산양자궁내막기질세포(ESCs),사선은정전염적세포극륭,진행표형감정、생장특성급E2、P4등성선격소적반응성측정.결과,전지2대적산양ESCs경전염pCI-neo-hTERT,G418사선2～3주후,항성극륭형성,려지편법전이,확증병련속배양,공획득5개세포극륭,확대배양후적세포정전형적장사형화삼각형,상호평행배렬성속,여원대배양형태일치.전염후세포유교고적단립매활성,세포증식가속,전대시간축단,전지50대잉은정증식.파형단백창측양성,각단백검측음성,구유전염전산양자궁내막기질세포특성.자격소(100 nmol·L-1)화소량잉격소(10 nmol·L-1)대전염후기질세포증식유촉진작용.획득료영생화적ESCs,위자궁내막세포체외연구전정료기출.
