胃肠病学和肝病学杂志
胃腸病學和肝病學雜誌
위장병학화간병학잡지
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY AND HEPATOLOGY
2009年
12期
1079-1082
,共4页
王甦%陈群%唐红%赵连三
王甦%陳群%唐紅%趙連三
왕소%진군%당홍%조련삼
乙型肝炎病毒%非肝源细胞%肝富集转录因子%转录与复制
乙型肝炎病毒%非肝源細胞%肝富集轉錄因子%轉錄與複製
을형간염병독%비간원세포%간부집전록인자%전록여복제
目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)在非肝源细胞的复制体系,探讨肝富集转录因子对HBV基因转录和复制的调控作用.方法 用复制型HBV重组质粒pHBV4.1与肝富集转录因子HNF3、HNF4和RXRα/PPARα的表达质粒分别共转染非肝源细胞株NIH3T3.用Northern吸印杂交检测HBV 3.5 kb、2.4/2.1 kb、0.7 kb mRNA的转录情况,Southern吸印杂交检测HBV DNA复制中间体水平.结果 复制型HBV重组质粒pHBV4.1在肝癌细胞中能检测到3.5 kb HBV RNA转录产物和HBV DNA复制中间体;用pHBV4.1转染NIH3T3细胞后,在没有肝富集转录因子表达质粒共转染时未能检出3.5 kb HBV RNA转录产物,也无HBV DNA复制中间体;当用肝富集转录因子共转染时,HNF4和RXRα/PPARα的表达能够激活3.5 kb HBV RNA转录和HBV DNA复制,而HNF3未能激活HBV复制,但在HNF4或RXRα/PPARα介导的病毒复制体系中,均见3.5 kb HBV mRNA的转录和HBV DNA复制水平下降.结论 利用肝富集转录因子成功地建立HBV在非肝源细胞中的转录与复制.其中,HNF4和RXRα/PPARα可支持HBV在非肝源细胞中转录与复制;HNF3抑制HBV肝特异性基因转录与复制.
目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)在非肝源細胞的複製體繫,探討肝富集轉錄因子對HBV基因轉錄和複製的調控作用.方法 用複製型HBV重組質粒pHBV4.1與肝富集轉錄因子HNF3、HNF4和RXRα/PPARα的錶達質粒分彆共轉染非肝源細胞株NIH3T3.用Northern吸印雜交檢測HBV 3.5 kb、2.4/2.1 kb、0.7 kb mRNA的轉錄情況,Southern吸印雜交檢測HBV DNA複製中間體水平.結果 複製型HBV重組質粒pHBV4.1在肝癌細胞中能檢測到3.5 kb HBV RNA轉錄產物和HBV DNA複製中間體;用pHBV4.1轉染NIH3T3細胞後,在沒有肝富集轉錄因子錶達質粒共轉染時未能檢齣3.5 kb HBV RNA轉錄產物,也無HBV DNA複製中間體;噹用肝富集轉錄因子共轉染時,HNF4和RXRα/PPARα的錶達能夠激活3.5 kb HBV RNA轉錄和HBV DNA複製,而HNF3未能激活HBV複製,但在HNF4或RXRα/PPARα介導的病毒複製體繫中,均見3.5 kb HBV mRNA的轉錄和HBV DNA複製水平下降.結論 利用肝富集轉錄因子成功地建立HBV在非肝源細胞中的轉錄與複製.其中,HNF4和RXRα/PPARα可支持HBV在非肝源細胞中轉錄與複製;HNF3抑製HBV肝特異性基因轉錄與複製.
목적 건립을형간염병독(HBV)재비간원세포적복제체계,탐토간부집전록인자대HBV기인전록화복제적조공작용.방법 용복제형HBV중조질립pHBV4.1여간부집전록인자HNF3、HNF4화RXRα/PPARα적표체질립분별공전염비간원세포주NIH3T3.용Northern흡인잡교검측HBV 3.5 kb、2.4/2.1 kb、0.7 kb mRNA적전록정황,Southern흡인잡교검측HBV DNA복제중간체수평.결과 복제형HBV중조질립pHBV4.1재간암세포중능검측도3.5 kb HBV RNA전록산물화HBV DNA복제중간체;용pHBV4.1전염NIH3T3세포후,재몰유간부집전록인자표체질립공전염시미능검출3.5 kb HBV RNA전록산물,야무HBV DNA복제중간체;당용간부집전록인자공전염시,HNF4화RXRα/PPARα적표체능구격활3.5 kb HBV RNA전록화HBV DNA복제,이HNF3미능격활HBV복제,단재HNF4혹RXRα/PPARα개도적병독복제체계중,균견3.5 kb HBV mRNA적전록화HBV DNA복제수평하강.결론 이용간부집전록인자성공지건립HBV재비간원세포중적전록여복제.기중,HNF4화RXRα/PPARα가지지HBV재비간원세포중전록여복제;HNF3억제HBV간특이성기인전록여복제.
