CAJ | 학술논문

目的建立并应用HCV基因分型技术PCR-反向点杂交法(PCR-RDH),调查广东地区丙型肝炎病毒(HCV)基因型和亚型的分布情况.方法应用生物信息学软件针对HCV 5'端非编码区(5'UTR)和核心蛋白区(C区)设计特异性捕获探针及生物素标记引物,建立HCV基因分型的PCR-反向点杂交技术.应用本技术对115例慢性丙型肝炎患者血清标本进行HCV基因型和亚型检测,同时对其中38份标本中的HCV进行RT-PCR扩增、测序、系统进化树分析确定HCV基因型和亚型,以评价反向点杂交法的准确性及临床应用价值.结果 115份血清标本中,反向点杂交法HCV基因型及亚型检出率为96.5%(111/115),15份阴性对照全部为阴性.111例检出基因型的标本中1b型63例(56.8%)、2a型9例(8.1%)、3a型4例(3.6%)、3b型6例(5.4%)、6a型28例(25.2%)、1b/2a混合型1例(0.9%).经测序分型确定此法检测准确度为100%,特异度为100%.结论 HCV基因型反向点杂交法检测准确可靠、简便经济、高效,适用于临床检测.广东地区的HCV基因型分布以1b型为主,呈现出1b型比例下降,3a、6a型比例升高的趋势.
목적 건립병응용HCV기인분형기술PCR-반향점잡교법(PCR-RDH),조사엄동지구병형간염병독(HCV)기인형화아형적분포정황.방법 응용생물신식학연건침대HCV 5'단비편마구(5'UTR)화핵심단백구(C구)설계특이성포획탐침급생물소표기인물,건립HCV기인분형적PCR-반향점잡교기술.응용본기술대115례만성병형간염환자혈청표본진행HCV기인형화아형검측,동시대기중38빈표본중적HCV진행RT-PCR확증、측서、계통진화수분석학정HCV기인형화아형,이평개반향점잡교법적준학성급림상응용개치.결과 115빈혈청표본중,반향점잡교법HCV기인형급아형검출솔위96.5%(111/115),15빈음성대조전부위음성.111례검출기인형적표본중1b형63례(56.8%)、2a형9례(8.1%)、3a형4례(3.6%)、3b형6례(5.4%)、6a형28례(25.2%)、1b/2a혼합형1례(0.9%).경측서분형학정차법검측준학도위100%,특이도위100%.결론 HCV기인형반향점잡교법검측준학가고、간편경제、고효,괄용우림상검측.엄동지구적HCV기인형분포이1b형위주,정현출1b형비례하강,3a、6a형비례승고적추세.