CAJ | 학술논문

本研究旨在探讨二烯丙基二硫化合物(diallyl disulfide,DADS)诱导白血病K562细胞凋亡的作用及Fas/FasL信号转导通路在DADS诱导白血病K562细胞凋亡作用中机制.以K562细胞为研究外培养的细胞分为空白组(2组)及药物处理组(4组),共6小组.空白组包括细胞对照组及溶媒对照组,药物处理组加入不同浓度DADS,DADS终浓度为10、20、40、80 mg/L.取对数生长期细胞进行实验.采用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞术分析不同浓度、不同时间DADS对K562细胞凋亡的诱导作用;RT-PCR法检测Fas、FasL mRNA表达变化.结果表明,DADS在浓度为10、20、40 mg/L时,K562细胞以凋亡效应为主.K562细胞出现细胞核缩小,染色质凝集、核膜破裂等凋亡特征;同一时间组(作用细胞24小时),DADS浓度从10 mg/L增至40mg/L,K562细胞的凋亡率由(2.10±0.25)%增至(37.94±0.87)%;同一浓度组(40 mg/L),DADS作用时间从24小时增至72小时,K562细胞的凋亡率由(37.94±0.87)%增至(47.02±0.66)%,各实验组随时间、浓度增加凋亡率明显增高(p＜0.01),呈现K562细胞的凋亡效用与药物浓度、时间明显依赖关系;作用48小时后,Fas mRNA 表达水平较对照组上调;FasL mRNA较对照组下调,差异具有统计学意义(p＜0.05).当DADS浓度为80 mg/L时,K562细胞以坏死效应为主.结论:DADS能够诱导K562细胞凋亡,其凋亡机制可能与上调Fas,下调FasL,激活Fas/FasL死亡受体通路有关.
본연구지재탐토이희병기이류화합물(diallyl disulfide,DADS)유도백혈병K562세포조망적작용급Fas/FasL신호전도통로재DADS유도백혈병K562세포조망작용중궤제.이K562세포위연구외배양적세포분위공백조(2조)급약물처리조(4조),공6소조.공백조포괄세포대조조급용매대조조,약물처리조가입불동농도DADS,DADS종농도위10、20、40、80 mg/L.취대수생장기세포진행실험.채용Hoechst33258염색법관찰세포조망형태학변화;류식세포술분석불동농도、불동시간DADS대K562세포조망적유도작용;RT-PCR법검측Fas、FasL mRNA표체변화.결과표명,DADS재농도위10、20、40 mg/L시,K562세포이조망효응위주.K562세포출현세포핵축소,염색질응집、핵막파렬등조망특정;동일시간조(작용세포24소시),DADS농도종10 mg/L증지40mg/L,K562세포적조망솔유(2.10±0.25)%증지(37.94±0.87)%;동일농도조(40 mg/L),DADS작용시간종24소시증지72소시,K562세포적조망솔유(37.94±0.87)%증지(47.02±0.66)%,각실험조수시간、농도증가조망솔명현증고(p＜0.01),정현K562세포적조망효용여약물농도、시간명현의뢰관계;작용48소시후,Fas mRNA 표체수평교대조조상조;FasL mRNA교대조조하조,차이구유통계학의의(p＜0.05).당DADS농도위80 mg/L시,K562세포이배사효응위주.결론:DADS능구유도K562세포조망,기조망궤제가능여상조Fas,하조FasL,격활Fas/FasL사망수체통로유관.