扬州大学学报（农业与生命科学版）
颺州大學學報（農業與生命科學版）
양주대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2012年
3期
1-4
,共4页
金文杰%郑志明%吉荣%钱文正%秦爱建
金文傑%鄭誌明%吉榮%錢文正%秦愛建
금문걸%정지명%길영%전문정%진애건
大肠杆菌%高致病性毒力岛(HPI)%Irp1%黏附作用
大腸桿菌%高緻病性毒力島(HPI)%Irp1%黏附作用
대장간균%고치병성독력도(HPI)%Irp1%점부작용
高致病性毒力岛(HPI)已经在多种类型大肠杆菌中被发现.为了解HPI- Irp1在细菌致病中的作用,通过生物软件DNAStar的分析,筛选出HPI中irp1和fyuA基因上10个表位作用优势较强的区域.设计特异性引物10对,进行PCR扩增,将获得的PCR产物,插入原核表达载体pET32a,构建重组质粒；将获得的重组质粒转化进入菌毛阴性宿主菌BL21,获得的重组菌用IPTG诱导表达后与Vero细胞混合进行体外作用.结果表明:带有irp1-1基因片段的重组菌BL21-rpET32a-irp1-1表现出对Vero细胞较强的聚集黏附作用,空载体对照和宿主菌对照均未出现相关现象.因而推测irp1-1基因片段编码的产物在细菌对宿主致病过程中,介导了细菌与宿主细胞的相互作用.
高緻病性毒力島(HPI)已經在多種類型大腸桿菌中被髮現.為瞭解HPI- Irp1在細菌緻病中的作用,通過生物軟件DNAStar的分析,篩選齣HPI中irp1和fyuA基因上10箇錶位作用優勢較彊的區域.設計特異性引物10對,進行PCR擴增,將穫得的PCR產物,插入原覈錶達載體pET32a,構建重組質粒；將穫得的重組質粒轉化進入菌毛陰性宿主菌BL21,穫得的重組菌用IPTG誘導錶達後與Vero細胞混閤進行體外作用.結果錶明:帶有irp1-1基因片段的重組菌BL21-rpET32a-irp1-1錶現齣對Vero細胞較彊的聚集黏附作用,空載體對照和宿主菌對照均未齣現相關現象.因而推測irp1-1基因片段編碼的產物在細菌對宿主緻病過程中,介導瞭細菌與宿主細胞的相互作用.
고치병성독력도(HPI)이경재다충류형대장간균중피발현.위료해HPI- Irp1재세균치병중적작용,통과생물연건DNAStar적분석,사선출HPI중irp1화fyuA기인상10개표위작용우세교강적구역.설계특이성인물10대,진행PCR확증,장획득적PCR산물,삽입원핵표체재체pET32a,구건중조질립；장획득적중조질립전화진입균모음성숙주균BL21,획득적중조균용IPTG유도표체후여Vero세포혼합진행체외작용.결과표명:대유irp1-1기인편단적중조균BL21-rpET32a-irp1-1표현출대Vero세포교강적취집점부작용,공재체대조화숙주균대조균미출현상관현상.인이추측irp1-1기인편단편마적산물재세균대숙주치병과정중,개도료세균여숙주세포적상호작용.
