CAJ | 학술논문

从ConA刺激的鸡脾细胞中扩增出鸡白细胞介素2(ChIL-2)基因编码区.将该编码区cDNA序列和调控其转录的鸡痘病毒早晚期启动子(PE/L)的基因片段定向克隆到鸡痘病毒转移载体p1175中,获得重组转移载体p1175IL2,然后转染已感染鸡痘病毒282E4疫苗株(wt-FPV)的鸡胚成纤维细胞(CEF),质粒p1175IL2与wt-FPV基因组DNA发生同源重组,产生了表达ChIL-2的重组鸡痘病毒rFPV-IL2.通过在含X-gal的营养琼脂上连续挑选蓝色病毒蚀斑,获得并纯化重组鸡痘病毒rFPV-IL2.应用XTT/PMS方法检测的rFPV-IL2 (M.O.I 2.0)感染CEF 72小时后细胞上清中表达的重组ChIL-2生物活性,效价为3.6×105u/mL,表明rFPV-IL2能有效地表达ChIL-2.下一步将利用rFPV-IL2在体内表达ChIL-2,研究ChIL-2的免疫增强作用及其作用机理.
종ConA자격적계비세포중확증출계백세포개소2(ChIL-2)기인편마구.장해편마구cDNA서렬화조공기전록적계두병독조만기계동자(PE/L)적기인편단정향극륭도계두병독전이재체p1175중,획득중조전이재체p1175IL2,연후전염이감염계두병독282E4역묘주(wt-FPV)적계배성섬유세포(CEF),질립p1175IL2여wt-FPV기인조DNA발생동원중조,산생료표체ChIL-2적중조계두병독rFPV-IL2.통과재함X-gal적영양경지상련속도선람색병독식반,획득병순화중조계두병독rFPV-IL2.응용XTT/PMS방법검측적rFPV-IL2 (M.O.I 2.0)감염CEF 72소시후세포상청중표체적중조ChIL-2생물활성,효개위3.6×105u/mL,표명rFPV-IL2능유효지표체ChIL-2.하일보장이용rFPV-IL2재체내표체ChIL-2,연구ChIL-2적면역증강작용급기작용궤리.