南通大学学报（医学版）
南通大學學報（醫學版）
남통대학학보（의학판）
JOURNAL OF NANTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2005年
6期
399-401
,共3页
热休克蛋白gp96%一氧化氮%游离钙%激光共聚焦扫描显微镜%巨噬细胞
熱休剋蛋白gp96%一氧化氮%遊離鈣%激光共聚焦掃描顯微鏡%巨噬細胞
열휴극단백gp96%일양화담%유리개%격광공취초소묘현미경%거서세포
目的:探讨从小鼠H22肝癌细胞中提纯的热休克蛋白gp96(HSPgp96)对小鼠腹腔巨噬细胞(PEMψ)NO释放的影响及其与细胞内外游离钙的关系.方法:(1)用亲和层析和离子交换层析等方法从小鼠H22肝癌细胞中获得纯化的HSPgp96.(2)用细胞内NO荧光探针DAF-FM-DA监测HSPgp96作用于小鼠PEMψ过程中,单个细胞NO信号的动态变化.(3)使用细胞膜和细胞内钙通道抑制剂及钙离子载体后,再观察HSPgp96作用后PEMψ内NO信号的变化.结果:小鼠PEMψ受Gp96刺激后显示NO的荧光强度立即上升,120s时达峰值87.58%±18.17%,在830s时降低接近正常水平.当分别抑制细胞外钙的内流和阻断细胞内钙库释放功能时,NO荧光值高峰明显降低.钙离子载体A23187可迅速诱导PEMψ内NO的合成,120s时达峰值196.02%±28.68%,随后轻度下降后又逐渐升高,20分钟观察结束时增幅达峰值216.38%±38.39%.如同时阻断胞外钙的内流及胞内钙库释钙功能时,PEMψ受Gp96刺激后NO荧光值高峰几乎消失.结论:Gp96可促使小鼠PEMψ的NO生成快速增加,并与细胞内钙的浓度升高有关.
目的:探討從小鼠H22肝癌細胞中提純的熱休剋蛋白gp96(HSPgp96)對小鼠腹腔巨噬細胞(PEMψ)NO釋放的影響及其與細胞內外遊離鈣的關繫.方法:(1)用親和層析和離子交換層析等方法從小鼠H22肝癌細胞中穫得純化的HSPgp96.(2)用細胞內NO熒光探針DAF-FM-DA鑑測HSPgp96作用于小鼠PEMψ過程中,單箇細胞NO信號的動態變化.(3)使用細胞膜和細胞內鈣通道抑製劑及鈣離子載體後,再觀察HSPgp96作用後PEMψ內NO信號的變化.結果:小鼠PEMψ受Gp96刺激後顯示NO的熒光彊度立即上升,120s時達峰值87.58%±18.17%,在830s時降低接近正常水平.噹分彆抑製細胞外鈣的內流和阻斷細胞內鈣庫釋放功能時,NO熒光值高峰明顯降低.鈣離子載體A23187可迅速誘導PEMψ內NO的閤成,120s時達峰值196.02%±28.68%,隨後輕度下降後又逐漸升高,20分鐘觀察結束時增幅達峰值216.38%±38.39%.如同時阻斷胞外鈣的內流及胞內鈣庫釋鈣功能時,PEMψ受Gp96刺激後NO熒光值高峰幾乎消失.結論:Gp96可促使小鼠PEMψ的NO生成快速增加,併與細胞內鈣的濃度升高有關.
목적:탐토종소서H22간암세포중제순적열휴극단백gp96(HSPgp96)대소서복강거서세포(PEMψ)NO석방적영향급기여세포내외유리개적관계.방법:(1)용친화층석화리자교환층석등방법종소서H22간암세포중획득순화적HSPgp96.(2)용세포내NO형광탐침DAF-FM-DA감측HSPgp96작용우소서PEMψ과정중,단개세포NO신호적동태변화.(3)사용세포막화세포내개통도억제제급개리자재체후,재관찰HSPgp96작용후PEMψ내NO신호적변화.결과:소서PEMψ수Gp96자격후현시NO적형광강도립즉상승,120s시체봉치87.58%±18.17%,재830s시강저접근정상수평.당분별억제세포외개적내류화조단세포내개고석방공능시,NO형광치고봉명현강저.개리자재체A23187가신속유도PEMψ내NO적합성,120s시체봉치196.02%±28.68%,수후경도하강후우축점승고,20분종관찰결속시증폭체봉치216.38%±38.39%.여동시조단포외개적내류급포내개고석개공능시,PEMψ수Gp96자격후NO형광치고봉궤호소실.결론:Gp96가촉사소서PEMψ적NO생성쾌속증가,병여세포내개적농도승고유관.
