军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2006年
4期
333-336,356
,共5页
王怡%孙萍%詹林盛%宋丽洁%李晖%孙红琰
王怡%孫萍%詹林盛%宋麗潔%李暉%孫紅琰
왕이%손평%첨림성%송려길%리휘%손홍염
核糖体%luffin-a%序列分析,DNA%金属离子亲和层析%基因表达
覈糖體%luffin-a%序列分析,DNA%金屬離子親和層析%基因錶達
핵당체%luffin-a%서렬분석,DNA%금속리자친화층석%기인표체
目的: 从丝瓜籽中克隆核糖体失活蛋白luffin-a 基因,并在原核系统进行表达.方法: 根据已报道的cDNA 序列设计引物,用RT-PCR 的方法从成熟的丝瓜籽中克隆luffin-a 基因,克隆后鉴定核苷酸序列.构建表达载体pET-28a(+)-luffin-a,转化大肠杆菌BL21 (DE3) ,并经IPTG 诱导表达.利用金属离子亲和层析的方法纯化所得目的蛋白.结果: 克隆的luffin-a 基因及其所编码的氨基酸序列与国外报道的核苷酸序列及氨基酸序列同源性分别为95%和92% ,因而所获得的luffin-a基因是丝瓜籽核糖体失活蛋白luffin-a一个新的cDNA序列.经SDS-PAGE分析: luffin-a 主要存在于包涵体中.金属离子亲和层析可纯化目的蛋白.结论: 本研究成功地克隆了luffin-a 一个新的序列,并建立了该蛋白的原核表达系统,同时利用亲和层析可一步法纯化获得目的蛋白.
目的: 從絲瓜籽中剋隆覈糖體失活蛋白luffin-a 基因,併在原覈繫統進行錶達.方法: 根據已報道的cDNA 序列設計引物,用RT-PCR 的方法從成熟的絲瓜籽中剋隆luffin-a 基因,剋隆後鑒定覈苷痠序列.構建錶達載體pET-28a(+)-luffin-a,轉化大腸桿菌BL21 (DE3) ,併經IPTG 誘導錶達.利用金屬離子親和層析的方法純化所得目的蛋白.結果: 剋隆的luffin-a 基因及其所編碼的氨基痠序列與國外報道的覈苷痠序列及氨基痠序列同源性分彆為95%和92% ,因而所穫得的luffin-a基因是絲瓜籽覈糖體失活蛋白luffin-a一箇新的cDNA序列.經SDS-PAGE分析: luffin-a 主要存在于包涵體中.金屬離子親和層析可純化目的蛋白.結論: 本研究成功地剋隆瞭luffin-a 一箇新的序列,併建立瞭該蛋白的原覈錶達繫統,同時利用親和層析可一步法純化穫得目的蛋白.
목적: 종사과자중극륭핵당체실활단백luffin-a 기인,병재원핵계통진행표체.방법: 근거이보도적cDNA 서렬설계인물,용RT-PCR 적방법종성숙적사과자중극륭luffin-a 기인,극륭후감정핵감산서렬.구건표체재체pET-28a(+)-luffin-a,전화대장간균BL21 (DE3) ,병경IPTG 유도표체.이용금속리자친화층석적방법순화소득목적단백.결과: 극륭적luffin-a 기인급기소편마적안기산서렬여국외보도적핵감산서렬급안기산서렬동원성분별위95%화92% ,인이소획득적luffin-a기인시사과자핵당체실활단백luffin-a일개신적cDNA서렬.경SDS-PAGE분석: luffin-a 주요존재우포함체중.금속리자친화층석가순화목적단백.결론: 본연구성공지극륭료luffin-a 일개신적서렬,병건립료해단백적원핵표체계통,동시이용친화층석가일보법순화획득목적단백.
