南京医科大学学报（自然科学版）
南京醫科大學學報（自然科學版）
남경의과대학학보（자연과학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2008年
5期
613-617
,共5页
庞斯斯%张小进%姜苏蓉%刘莉%程蕴琳
龐斯斯%張小進%薑囌蓉%劉莉%程蘊琳
방사사%장소진%강소용%류리%정온림
热休克蛋白27%Akt%氧化应激
熱休剋蛋白27%Akt%氧化應激
열휴극단백27%Akt%양화응격
目的:探讨小分子热休克蛋白27保护大鼠心肌细胞过氧化损伤的机制.方法:①以稳定转染 pCDNA3.1/Hsp27质粒并稳定高表达Hsp27的大鼠心肌细胞株H9c2(H9c2-Hsp27)为研究对象.对照组采用稳定转染pCDNA3.1质粒的H9c2(H9c2-Vector)细胞;②氧化应激诱导和检测:500 μmol/L H2O2处理细胞后进行如下分析:培养上清中的 LDH 活性、细胞形态学改变、细胞内Akt激活水平;③Akt在Hsp27保护 H2O2诱导H9c2损伤中的作用:以Akt抑制剂Triciribine处理H9c2-Hsp27,观察其对Hsp27保护H2O2诱导H9c2形态学变化的影响.结果:①H2O2诱导H9c2细胞向培养上清释放的LDH显著增加(P<0.01),但与对照组相比,Hsp27 高表达显著抑制了 H2O2诱导的LDH释放(P<0.01);②H2O2处理后,H9c2细胞Akt磷酸化水平增加(P<0.01或P<0.05),但与H9c2-Vector比较,H9c2-Hsp27的Akt磷酸化水平进一步增强(P<0.05);③Akt磷酸化被抑制后,Hsp27对H2O2诱导H9c2细胞形态学改变的保护作用消失.结论:Akt激活是Hsp27保护大鼠心肌细胞过氧化损伤的重要机制.
目的:探討小分子熱休剋蛋白27保護大鼠心肌細胞過氧化損傷的機製.方法:①以穩定轉染 pCDNA3.1/Hsp27質粒併穩定高錶達Hsp27的大鼠心肌細胞株H9c2(H9c2-Hsp27)為研究對象.對照組採用穩定轉染pCDNA3.1質粒的H9c2(H9c2-Vector)細胞;②氧化應激誘導和檢測:500 μmol/L H2O2處理細胞後進行如下分析:培養上清中的 LDH 活性、細胞形態學改變、細胞內Akt激活水平;③Akt在Hsp27保護 H2O2誘導H9c2損傷中的作用:以Akt抑製劑Triciribine處理H9c2-Hsp27,觀察其對Hsp27保護H2O2誘導H9c2形態學變化的影響.結果:①H2O2誘導H9c2細胞嚮培養上清釋放的LDH顯著增加(P<0.01),但與對照組相比,Hsp27 高錶達顯著抑製瞭 H2O2誘導的LDH釋放(P<0.01);②H2O2處理後,H9c2細胞Akt燐痠化水平增加(P<0.01或P<0.05),但與H9c2-Vector比較,H9c2-Hsp27的Akt燐痠化水平進一步增彊(P<0.05);③Akt燐痠化被抑製後,Hsp27對H2O2誘導H9c2細胞形態學改變的保護作用消失.結論:Akt激活是Hsp27保護大鼠心肌細胞過氧化損傷的重要機製.
목적:탐토소분자열휴극단백27보호대서심기세포과양화손상적궤제.방법:①이은정전염 pCDNA3.1/Hsp27질립병은정고표체Hsp27적대서심기세포주H9c2(H9c2-Hsp27)위연구대상.대조조채용은정전염pCDNA3.1질립적H9c2(H9c2-Vector)세포;②양화응격유도화검측:500 μmol/L H2O2처리세포후진행여하분석:배양상청중적 LDH 활성、세포형태학개변、세포내Akt격활수평;③Akt재Hsp27보호 H2O2유도H9c2손상중적작용:이Akt억제제Triciribine처리H9c2-Hsp27,관찰기대Hsp27보호H2O2유도H9c2형태학변화적영향.결과:①H2O2유도H9c2세포향배양상청석방적LDH현저증가(P<0.01),단여대조조상비,Hsp27 고표체현저억제료 H2O2유도적LDH석방(P<0.01);②H2O2처리후,H9c2세포Akt린산화수평증가(P<0.01혹P<0.05),단여H9c2-Vector비교,H9c2-Hsp27적Akt린산화수평진일보증강(P<0.05);③Akt린산화피억제후,Hsp27대H2O2유도H9c2세포형태학개변적보호작용소실.결론:Akt격활시Hsp27보호대서심기세포과양화손상적중요궤제.
