弓形虫表面抗原SAG3基因的克隆与表达
궁형충표면항원SAG3기인적극륭여표체
Cloing and expression of surface antigen gene SAG3 of Toxoplasma gondii
  • 万方数据
    中国人兽共患病学报 중국인수공환병학보
    CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
    2008年 6期 562-565 ,共4页

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    궁형충%표면항원SAG3%기인극륭%단백표체
    目的 克隆表达弓形虫RH株SAG3基因,为深入研究其结构及功能奠定基础.方法 从弓形虫RH株基因组DNA中特异性扩增出编码SAG3基因的片段,相应酶切后克隆入原核表达载体pET-30a(+)中,构建pET-SAG3重组质粒.将pET30-SAG3重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株.经EcoRⅠ、 HindⅢ酶切及测序鉴定后,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,用SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白表达情况.结果 体外扩增的SAG3基因片段与目的片段大小相符约1155bp,成功构建了重组表达质粒pET30-SAG3, SDS-PAGE、 Western blot显示SAG3-His融合蛋白的分子量大小约为50kd.结论 弓形虫表面抗原SAG3基因在大肠杆菌中成功表达,为进一步研究SAG3的结构和功能奠定基础.
    목적 극륭표체궁형충RH주SAG3기인,위심입연구기결구급공능전정기출.방법 종궁형충RH주기인조DNA중특이성확증출편마SAG3기인적편단,상응매절후극륭입원핵표체재체pET-30a(+)중,구건pET-SAG3중조질립.장pET30-SAG3중조질립전화대장간균BL21(DE3)균주.경EcoRⅠ、 HindⅢ매절급측서감정후,이병기류대-β-D-반유당감(IPTG)유도표체융합단백,용SDS-PAGE화Western blot감정단백표체정황.결과 체외확증적SAG3기인편단여목적편단대소상부약1155bp,성공구건료중조표체질립pET30-SAG3, SDS-PAGE、 Western blot현시SAG3-His융합단백적분자량대소약위50kd.결론 궁형충표면항원SAG3기인재대장간균중성공표체,위진일보연구SAG3적결구화공능전정기출.
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