畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2008年
10期
1406-1410
,共5页
杨彩明%杨光友%张晓谦%贾小勇%余增莹
楊綵明%楊光友%張曉謙%賈小勇%餘增瑩
양채명%양광우%장효겸%가소용%여증형
孤雌牛殖%长角血蜱%P27/30基因%克隆%原核表达
孤雌牛殖%長角血蜱%P27/30基因%剋隆%原覈錶達
고자우식%장각혈비%P27/30기인%극륭%원핵표체
采用RT-PCR技术首次从孤雌生殖长角血蜱四川株克隆到P27/30基因,扩增序列全长670 bp,包含完整的开放阅读框,编码201个氨基酸,预测蛋白相对分子质量为23.38 ku.同源性分析表明孤雌牛殖长角血蜱中国株与日本株P27/30基凶同源性高达99.85%.经RT-PCR检测分析,该基因在孤雌生殖长角血蜱的卵、幼蜱、若蜱、饥饿成蜱和饱血成蜱这儿个阶段均有表达.将该基凶亚克隆后连接到pET32a(+)原核表达载体,转化BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导可成功进行表达.表达的目的蛋白大小为24 ku左右,与预期大小一致;Western-blot显示兔抗长角血蜱伞虫抗体能够识别该重组表达蛋白.
採用RT-PCR技術首次從孤雌生殖長角血蜱四川株剋隆到P27/30基因,擴增序列全長670 bp,包含完整的開放閱讀框,編碼201箇氨基痠,預測蛋白相對分子質量為23.38 ku.同源性分析錶明孤雌牛殖長角血蜱中國株與日本株P27/30基兇同源性高達99.85%.經RT-PCR檢測分析,該基因在孤雌生殖長角血蜱的卵、幼蜱、若蜱、饑餓成蜱和飽血成蜱這兒箇階段均有錶達.將該基兇亞剋隆後連接到pET32a(+)原覈錶達載體,轉化BL21(DE3)宿主菌,經IPTG誘導可成功進行錶達.錶達的目的蛋白大小為24 ku左右,與預期大小一緻;Western-blot顯示兔抗長角血蜱傘蟲抗體能夠識彆該重組錶達蛋白.
채용RT-PCR기술수차종고자생식장각혈비사천주극륭도P27/30기인,확증서렬전장670 bp,포함완정적개방열독광,편마201개안기산,예측단백상대분자질량위23.38 ku.동원성분석표명고자우식장각혈비중국주여일본주P27/30기흉동원성고체99.85%.경RT-PCR검측분석,해기인재고자생식장각혈비적란、유비、약비、기아성비화포혈성비저인개계단균유표체.장해기흉아극륭후련접도pET32a(+)원핵표체재체,전화BL21(DE3)숙주균,경IPTG유도가성공진행표체.표체적목적단백대소위24 ku좌우,여예기대소일치;Western-blot현시토항장각혈비산충항체능구식별해중조표체단백.
