CAJ | 학술논문

目的:构建含有人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)胞外段基因的真核表达质粒hGITRaa1-165-IgG1Fc-peDNA3.1(+),检测hGITRaa1-165-IgGIFc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达.方法:以pGEMT-GITR质粒为模板,通过PCR扩增获得人GITR胞外段的基因hGITRaa1-165,将该目的基因连接至IsGlFc-pcDNA3.1(+)质粒,构建hGITRaa1-165-lgG1Fc-pcDNA3.1(+)真核表达质粒.将该重组质粒采用脂质体法转染COS-7细胞,通过SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达.结果:成功构建真核表达质粒hGI-TRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),并在其转染的COS-7细胞培养上清中检测到hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白的表达.结论:成功表达hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白,为进一步研究GITR的生物学功能奠定了基础.
목적:구건함유인당피질격소유도적종류배사인자수체(GITR)포외단기인적진핵표체질립hGITRaa1-165-IgG1Fc-peDNA3.1(+),검측hGITRaa1-165-IgGIFc융합단백재진핵세포COS-7중적표체.방법:이pGEMT-GITR질립위모판,통과PCR확증획득인GITR포외단적기인hGITRaa1-165,장해목적기인련접지IsGlFc-pcDNA3.1(+)질립,구건hGITRaa1-165-lgG1Fc-pcDNA3.1(+)진핵표체질립.장해중조질립채용지질체법전염COS-7세포,통과SDS-PAGE화단백질인적법검측hGITRaa1-165-IgG1Fc융합단백재진핵세포COS-7중적표체.결과:성공구건진핵표체질립hGI-TRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),병재기전염적COS-7세포배양상청중검측도hGITRaa1-165-IgG1Fc융합단백적표체.결론:성공표체hGITRaa1-165-IgG1Fc융합단백,위진일보연구GITR적생물학공능전정료기출.