西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2009年
7期
1082-1084
,共3页
黄平%高秀峰%高鸿霞%郑素平
黃平%高秀峰%高鴻霞%鄭素平
황평%고수봉%고홍하%정소평
核干细胞因子%RNA干扰%真核表达载体%肺癌细胞
覈榦細胞因子%RNA榦擾%真覈錶達載體%肺癌細胞
핵간세포인자%RNA간우%진핵표체재체%폐암세포
目的 探讨A549细胞株NS基因的表达干扰后,A549细胞株的mRNA表达水平及细胞增殖变化.方法 构建NS shRNA真核表达载体,转染A549细胞,G418筛选稳定表达细胞克隆,RT-PCR检测NS基因沉默,MTT检测细胞增殖情况.结果 构建的NS shRNA真核表达载体经菌落PCR和测序证实重组表达载体中插入序列与设计一致.RT-PCR检测显示构建的shRNA表达载体转染A549细胞后可显著降低NS mRNA的表达;MTT结果显示干扰后细胞增殖速率明显减低.结论 成功构建了一组针对NS基因的shRNA真核表达载体,转染A549钿胞后NS基因表达被特异性沉默,且细胞增殖受到明显抑制,通过RNAi技术实现NS基因沉默可能是一种较有前景的肿瘤治疗方法.
目的 探討A549細胞株NS基因的錶達榦擾後,A549細胞株的mRNA錶達水平及細胞增殖變化.方法 構建NS shRNA真覈錶達載體,轉染A549細胞,G418篩選穩定錶達細胞剋隆,RT-PCR檢測NS基因沉默,MTT檢測細胞增殖情況.結果 構建的NS shRNA真覈錶達載體經菌落PCR和測序證實重組錶達載體中插入序列與設計一緻.RT-PCR檢測顯示構建的shRNA錶達載體轉染A549細胞後可顯著降低NS mRNA的錶達;MTT結果顯示榦擾後細胞增殖速率明顯減低.結論 成功構建瞭一組針對NS基因的shRNA真覈錶達載體,轉染A549鈿胞後NS基因錶達被特異性沉默,且細胞增殖受到明顯抑製,通過RNAi技術實現NS基因沉默可能是一種較有前景的腫瘤治療方法.
목적 탐토A549세포주NS기인적표체간우후,A549세포주적mRNA표체수평급세포증식변화.방법 구건NS shRNA진핵표체재체,전염A549세포,G418사선은정표체세포극륭,RT-PCR검측NS기인침묵,MTT검측세포증식정황.결과 구건적NS shRNA진핵표체재체경균락PCR화측서증실중조표체재체중삽입서렬여설계일치.RT-PCR검측현시구건적shRNA표체재체전염A549세포후가현저강저NS mRNA적표체;MTT결과현시간우후세포증식속솔명현감저.결론 성공구건료일조침대NS기인적shRNA진핵표체재체,전염A549전포후NS기인표체피특이성침묵,차세포증식수도명현억제,통과RNAi기술실현NS기인침묵가능시일충교유전경적종류치료방법.
