军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2012年
7期
516-519
,共4页
李典镕%詹轶群%许望翔%于淼
李典镕%詹軼群%許望翔%于淼
리전용%첨질군%허망상%우묘
肝细胞核因子1α%异染色质蛋白1γ%蛋白质相互作用%转录调节
肝細胞覈因子1α%異染色質蛋白1γ%蛋白質相互作用%轉錄調節
간세포핵인자1α%이염색질단백1γ%단백질상호작용%전록조절
目的 初步探讨肝细胞核因子1α(HNF1α)与异染色质蛋白1γ(HP1γ)的相互作用及其功能.方法 首先以成人肝cDNA文库为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增出552 bp的HP1γ cDNA片段,然后亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1/Myc-HisB,转染HepG2细胞后提取总蛋白进行Western印迹鉴定,进而通过GST沉降实验验证HP1γ与HNF1α的相互作用区段,最后通过荧光素酶报告基因实验HP1γ/HNF1α相互作用的功能.结果 通过测序证实真核表达载体Myc-HP1γ构建成功,Western印迹证明Myc-HP1γ可在真核细胞中表达;GST沉降结果 表明HP1γ与HNF1α的N端1-189氨基酸相互作用;报告基因实验证明HP1γ抑制HNF1α的转录活性.结论 HP1γ通过与HNF1α相互作用抑制HNF1α的转录活性.
目的 初步探討肝細胞覈因子1α(HNF1α)與異染色質蛋白1γ(HP1γ)的相互作用及其功能.方法 首先以成人肝cDNA文庫為模闆,通過聚閤酶鏈反應(PCR)擴增齣552 bp的HP1γ cDNA片段,然後亞剋隆到真覈錶達載體pcDNA3.1/Myc-HisB,轉染HepG2細胞後提取總蛋白進行Western印跡鑒定,進而通過GST沉降實驗驗證HP1γ與HNF1α的相互作用區段,最後通過熒光素酶報告基因實驗HP1γ/HNF1α相互作用的功能.結果 通過測序證實真覈錶達載體Myc-HP1γ構建成功,Western印跡證明Myc-HP1γ可在真覈細胞中錶達;GST沉降結果 錶明HP1γ與HNF1α的N耑1-189氨基痠相互作用;報告基因實驗證明HP1γ抑製HNF1α的轉錄活性.結論 HP1γ通過與HNF1α相互作用抑製HNF1α的轉錄活性.
목적 초보탐토간세포핵인자1α(HNF1α)여이염색질단백1γ(HP1γ)적상호작용급기공능.방법 수선이성인간cDNA문고위모판,통과취합매련반응(PCR)확증출552 bp적HP1γ cDNA편단,연후아극륭도진핵표체재체pcDNA3.1/Myc-HisB,전염HepG2세포후제취총단백진행Western인적감정,진이통과GST침강실험험증HP1γ여HNF1α적상호작용구단,최후통과형광소매보고기인실험HP1γ/HNF1α상호작용적공능.결과 통과측서증실진핵표체재체Myc-HP1γ구건성공,Western인적증명Myc-HP1γ가재진핵세포중표체;GST침강결과 표명HP1γ여HNF1α적N단1-189안기산상호작용;보고기인실험증명HP1γ억제HNF1α적전록활성.결론 HP1γ통과여HNF1α상호작용억제HNF1α적전록활성.
