CAJ | 학술논문

目的评估表达Ngn3的细胞对成体胰岛维护和更新的作用及其意义.方法用6～8周龄的C57BL/6小鼠分离胰岛.胆总管内插管成功后,切除胰腺组织并用浓度为2.5 mg/ml胶原蛋白酶V灌注消化.手工拣取胰岛后, 置于60 mm培养皿内,每个培养皿内含10～12个胰岛,用RPMI-1640(12.5 mmol/L HEPES, 5.2 mmol/L 葡萄糖和 2% 胎牛血清)培养液培养.用A6抗体, 胰岛素抗体,胰高血糖素抗体,Nestin抗体, Ngn3抗体和 5′-溴-2-脱氧尿嘧啶(5-bromo- 2′-deoxy-uridine,BrdU)抗体进行胰岛细胞免疫荧光染色.结果在增殖的胰岛细胞中,只有不到15%的细胞表达Ngn3,其中约有30%以上的细胞同时表达A6.在培养的胰岛细胞中存在表达Ngn3的细胞,这一结果与其他在胚胎发育和成体胰岛中的研究结果一致.本研究发现培养的胰岛细胞中存在同时表达A6和Ngn3的细胞.A6被认为是可分化为胆管上皮细胞的肝脏前体细胞的标记物.胰岛内表达A6的细胞可能来源于成体胰管,并迁移至胰岛内.细胞表达A6的同时表达Ngn3,表明这些细胞在胰岛内可分化为内分泌细胞.结论培养的胰岛细胞中发现共同表达Ngn3 和A6 的细胞,表明胰岛内的4种内分泌细胞可能来源于成体胰岛中的同一内分泌细胞系.A6 和 Ngn3是对胰岛内成体干细胞研究很有帮助的标记物.这可以让我们进一步了解IPC的增殖和分化,并且有可能通过胰岛内成体干细胞来治疗糖尿病.
목적평고표체Ngn3적세포대성체이도유호화경신적작용급기의의.방법용6～8주령적C57BL/6소서분리이도.담총관내삽관성공후,절제이선조직병용농도위2.5 mg/ml효원단백매V관주소화.수공간취이도후, 치우60 mm배양명내,매개배양명내함10～12개이도,용RPMI-1640(12.5 mmol/L HEPES, 5.2 mmol/L 포도당화 2% 태우혈청)배양액배양.용A6항체, 이도소항체,이고혈당소항체,Nestin항체, Ngn3항체화 5′-추-2-탈양뇨밀정(5-bromo- 2′-deoxy-uridine,BrdU)항체진행이도세포면역형광염색.결과재증식적이도세포중,지유불도15%적세포표체Ngn3,기중약유30%이상적세포동시표체A6.재배양적이도세포중존재표체Ngn3적세포,저일결과여기타재배태발육화성체이도중적연구결과일치.본연구발현배양적이도세포중존재동시표체A6화Ngn3적세포.A6피인위시가분화위담관상피세포적간장전체세포적표기물.이도내표체A6적세포가능래원우성체이관,병천이지이도내.세포표체A6적동시표체Ngn3,표명저사세포재이도내가분화위내분비세포.결론배양적이도세포중발현공동표체Ngn3 화A6 적세포,표명이도내적4충내분비세포가능래원우성체이도중적동일내분비세포계.A6 화 Ngn3시대이도내성체간세포연구흔유방조적표기물.저가이양아문진일보료해IPC적증식화분화,병차유가능통과이도내성체간세포래치료당뇨병.