湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2007年
1期
18-20
,共3页
常林瑞%孙振兴%李莉%李云玲
常林瑞%孫振興%李莉%李雲玲
상림서%손진흥%리리%리운령
刺参%DNA提取%随机扩增多态性DNA%优化
刺參%DNA提取%隨機擴增多態性DNA%優化
자삼%DNA제취%수궤확증다태성DNA%우화
以野生刺参为试验材料,探索了刺参基因组的提取方法,并对影响RAPD反应的各因素进行了优化,建立了刺参的优化反应体系和程序.反应体系总体积为25μL,各组分的含量为10倍缓冲液2.5μL,Mg2+(20 mmol·L-1)3μL,TaqDNA聚合酶(1 U·μL-1)1.5μL,dNTPs(10 mmol·L-1)2.5μL,随机引物(5pmol·μL-1)1μL,模板DNA(40 ng·μL-1)2.5μL.PCR循环程序为96℃预变性5 min;94℃变性0.5 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min,35个循环;最后72℃延伸10 min.
以野生刺參為試驗材料,探索瞭刺參基因組的提取方法,併對影響RAPD反應的各因素進行瞭優化,建立瞭刺參的優化反應體繫和程序.反應體繫總體積為25μL,各組分的含量為10倍緩遲液2.5μL,Mg2+(20 mmol·L-1)3μL,TaqDNA聚閤酶(1 U·μL-1)1.5μL,dNTPs(10 mmol·L-1)2.5μL,隨機引物(5pmol·μL-1)1μL,模闆DNA(40 ng·μL-1)2.5μL.PCR循環程序為96℃預變性5 min;94℃變性0.5 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min,35箇循環;最後72℃延伸10 min.
이야생자삼위시험재료,탐색료자삼기인조적제취방법,병대영향RAPD반응적각인소진행료우화,건립료자삼적우화반응체계화정서.반응체계총체적위25μL,각조분적함량위10배완충액2.5μL,Mg2+(20 mmol·L-1)3μL,TaqDNA취합매(1 U·μL-1)1.5μL,dNTPs(10 mmol·L-1)2.5μL,수궤인물(5pmol·μL-1)1μL,모판DNA(40 ng·μL-1)2.5μL.PCR순배정서위96℃예변성5 min;94℃변성0.5 min,36℃퇴화1 min,72℃연신1 min,35개순배;최후72℃연신10 min.
