胃肠病学
胃腸病學
위장병학
CHINESE JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY
2008年
5期
276-280
,共5页
杨柳芹%房殿春%杨仕明%汪荣泉%彭贵勇%陈文生
楊柳芹%房殿春%楊仕明%汪榮泉%彭貴勇%陳文生
양류근%방전춘%양사명%왕영천%팽귀용%진문생
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体%自细胞介素2%腺病毒科%复制缺陷%遗传载体
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體%自細胞介素2%腺病毒科%複製缺陷%遺傳載體
종류배사인자상관조망유도배체%자세포개소2%선병독과%복제결함%유전재체
背景：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)能诱导30余种人类肿瘤细胞凋亡．在抗肿瘤治疗中具有广阔应用前景.目的:构建携带可溶性TRAIL基因的复制缺陷型重组腺病毒载体,鉴定其在肝癌细胞株中的表达.方法:以重叠延伸聚合酶链反应(PCR)扩增白细胞介素(IL)-2信号肽和TRAIL膜外区融合片段,克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV．转化含复制缺陷型腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌pAdBJ5183,经细菌内同源重组产生重组腺病毒Ad-IL-2-TRAIL,以脂质体法转染HEK293细胞包装病毒,感染肝癌细胞株HepG2,荧光显微镜下观察增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达.结果:成功构建了携带可溶性TRAIL基因的复制缺陷型重组腺病毒载体.病毒感染HepG2细胞48 h后．超过95％的细胞中出现绿色荧光.结论:所构建的复制缺陷型重组腺病毒Ad-IL-2-TRAIL可在肝癌细胞中高效表达可溶性TRAIL．为进一步行肿瘤TRAIL基因治疗提供了实验依据.
揹景：腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)能誘導30餘種人類腫瘤細胞凋亡．在抗腫瘤治療中具有廣闊應用前景.目的:構建攜帶可溶性TRAIL基因的複製缺陷型重組腺病毒載體,鑒定其在肝癌細胞株中的錶達.方法:以重疊延伸聚閤酶鏈反應(PCR)擴增白細胞介素(IL)-2信號肽和TRAIL膜外區融閤片段,剋隆于腺病毒穿梭質粒pAdTrack-CMV．轉化含複製缺陷型腺病毒骨架質粒pAdEasy-1的大腸桿菌pAdBJ5183,經細菌內同源重組產生重組腺病毒Ad-IL-2-TRAIL,以脂質體法轉染HEK293細胞包裝病毒,感染肝癌細胞株HepG2,熒光顯微鏡下觀察增彊型綠色熒光蛋白(EGFP)的錶達.結果:成功構建瞭攜帶可溶性TRAIL基因的複製缺陷型重組腺病毒載體.病毒感染HepG2細胞48 h後．超過95％的細胞中齣現綠色熒光.結論:所構建的複製缺陷型重組腺病毒Ad-IL-2-TRAIL可在肝癌細胞中高效錶達可溶性TRAIL．為進一步行腫瘤TRAIL基因治療提供瞭實驗依據.
배경：종류배사인자상관조망유도배체(TRAIL)능유도30여충인류종류세포조망．재항종류치료중구유엄활응용전경.목적:구건휴대가용성TRAIL기인적복제결함형중조선병독재체,감정기재간암세포주중적표체.방법:이중첩연신취합매련반응(PCR)확증백세포개소(IL)-2신호태화TRAIL막외구융합편단,극륭우선병독천사질립pAdTrack-CMV．전화함복제결함형선병독골가질립pAdEasy-1적대장간균pAdBJ5183,경세균내동원중조산생중조선병독Ad-IL-2-TRAIL,이지질체법전염HEK293세포포장병독,감염간암세포주HepG2,형광현미경하관찰증강형록색형광단백(EGFP)적표체.결과:성공구건료휴대가용성TRAIL기인적복제결함형중조선병독재체.병독감염HepG2세포48 h후．초과95％적세포중출현록색형광.결론:소구건적복제결함형중조선병독Ad-IL-2-TRAIL가재간암세포중고효표체가용성TRAIL．위진일보행종류TRAIL기인치료제공료실험의거.
