中国皮肤性病学杂志
中國皮膚性病學雜誌
중국피부성병학잡지
THE CHINESE JOURNAL OF DERMATOVENEREOLOGY
2008年
9期
516-518
,共3页
杨春华%刘彦群%魏志平%毛立军%裴东生%史震%郑骏年
楊春華%劉彥群%魏誌平%毛立軍%裴東生%史震%鄭駿年
양춘화%류언군%위지평%모립군%배동생%사진%정준년
溶瘤腺病毒%IL-18%黑素瘤
溶瘤腺病毒%IL-18%黑素瘤
용류선병독%IL-18%흑소류
目的 构建携带人IL-18基因的溶瘤腺病毒,观察在A375细胞中IL-18基因的表达情况.方法 将pZD55-IL-18与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染293细胞获得重组腺病毒.PCR鉴定条件增殖腺病毒ZD55-IL-18.以ZD55-IL-18感染人黑素瘤A375细胞系,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-18基因mRNA的表达;Western blot法检测腺病毒EIA的表达情况;结晶紫染色法检测细胞杀伤作用;MTT法检测细胞存活情况.结果 PCR鉴定表明ZD55-IL-18构建成功;RT-PCR和Western blot结果表明,ZD55-IL-18能高效介导IL-18基因在A375细胞中的表达,并在肿瘤细胞内表达E1A;结晶紫染色和MTT结果表明,ZD55-IL-18对A375细胞有明显的杀伤作用.结论 构建成功的溶瘤腺病毒ZD55-IL-18,可在A375细胞中高效表达IL-18基因,并能抑制黑素瘤细胞生长.
目的 構建攜帶人IL-18基因的溶瘤腺病毒,觀察在A375細胞中IL-18基因的錶達情況.方法 將pZD55-IL-18與含有腺病毒右臂的質粒pBHGE3共轉染293細胞穫得重組腺病毒.PCR鑒定條件增殖腺病毒ZD55-IL-18.以ZD55-IL-18感染人黑素瘤A375細胞繫,通過逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測IL-18基因mRNA的錶達;Western blot法檢測腺病毒EIA的錶達情況;結晶紫染色法檢測細胞殺傷作用;MTT法檢測細胞存活情況.結果 PCR鑒定錶明ZD55-IL-18構建成功;RT-PCR和Western blot結果錶明,ZD55-IL-18能高效介導IL-18基因在A375細胞中的錶達,併在腫瘤細胞內錶達E1A;結晶紫染色和MTT結果錶明,ZD55-IL-18對A375細胞有明顯的殺傷作用.結論 構建成功的溶瘤腺病毒ZD55-IL-18,可在A375細胞中高效錶達IL-18基因,併能抑製黑素瘤細胞生長.
목적 구건휴대인IL-18기인적용류선병독,관찰재A375세포중IL-18기인적표체정황.방법 장pZD55-IL-18여함유선병독우비적질립pBHGE3공전염293세포획득중조선병독.PCR감정조건증식선병독ZD55-IL-18.이ZD55-IL-18감염인흑소류A375세포계,통과역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측IL-18기인mRNA적표체;Western blot법검측선병독EIA적표체정황;결정자염색법검측세포살상작용;MTT법검측세포존활정황.결과 PCR감정표명ZD55-IL-18구건성공;RT-PCR화Western blot결과표명,ZD55-IL-18능고효개도IL-18기인재A375세포중적표체,병재종류세포내표체E1A;결정자염색화MTT결과표명,ZD55-IL-18대A375세포유명현적살상작용.결론 구건성공적용류선병독ZD55-IL-18,가재A375세포중고효표체IL-18기인,병능억제흑소류세포생장.
