食用菌学报
食用菌學報
식용균학보
ACTA EDULIS FUNGI
2008年
4期
11-19
,共9页
何丽鸿%于荣利%陈明杰%潘迎捷
何麗鴻%于榮利%陳明傑%潘迎捷
하려홍%우영리%진명걸%반영첩
双孢蘑菇%培养料后发酵%细菌16S rDNA文库
雙孢蘑菇%培養料後髮酵%細菌16S rDNA文庫
쌍포마고%배양료후발효%세균16S rDNA문고
采用化学裂解和酶解相结合的方法,以加入PVPP的高盐缓冲液作为细胞裂解反应体系,用PEG-8000进行DNA沉淀,从双孢蘑菇堆肥后发酵的4个代表时期培养料样品中提取微生物总DNA.再以总DNA为模板,以专用引物F27和R1498进行PCR扩增,获得16S rDNA片段,经纯化后构建4个时期样品的细菌16S rDNA文库.试验结果表明,本试验获得的总DNA质量较好,采用PCR扩增可获得多个细菌、放线菌和真菌特异片段;细菌16S rDNA文库的目的片段插入效率在90%以上.
採用化學裂解和酶解相結閤的方法,以加入PVPP的高鹽緩遲液作為細胞裂解反應體繫,用PEG-8000進行DNA沉澱,從雙孢蘑菇堆肥後髮酵的4箇代錶時期培養料樣品中提取微生物總DNA.再以總DNA為模闆,以專用引物F27和R1498進行PCR擴增,穫得16S rDNA片段,經純化後構建4箇時期樣品的細菌16S rDNA文庫.試驗結果錶明,本試驗穫得的總DNA質量較好,採用PCR擴增可穫得多箇細菌、放線菌和真菌特異片段;細菌16S rDNA文庫的目的片段插入效率在90%以上.
채용화학렬해화매해상결합적방법,이가입PVPP적고염완충액작위세포렬해반응체계,용PEG-8000진행DNA침정,종쌍포마고퇴비후발효적4개대표시기배양료양품중제취미생물총DNA.재이총DNA위모판,이전용인물F27화R1498진행PCR확증,획득16S rDNA편단,경순화후구건4개시기양품적세균16S rDNA문고.시험결과표명,본시험획득적총DNA질량교호,채용PCR확증가획득다개세균、방선균화진균특이편단;세균16S rDNA문고적목적편단삽입효솔재90%이상.
