江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2009年
5期
401-404
,共4页
朱照辉%林江%钱军%姚冬明%钱震%王雅丽%韩兰秀%肖高飞
硃照輝%林江%錢軍%姚鼕明%錢震%王雅麗%韓蘭秀%肖高飛
주조휘%림강%전군%요동명%전진%왕아려%한란수%초고비
实时定量PCR%EvaGreen染料%PRAME基因%急性髓系白血病
實時定量PCR%EvaGreen染料%PRAME基因%急性髓繫白血病
실시정량PCR%EvaGreen염료%PRAME기인%급성수계백혈병
目的:采用实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)法检测急性髓系白血病(AML)中黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)基因转录本,初步评价其在AML中的临床意义. 方法:设计PRAME基因引物,建立扩增PRAME基因转录本的EvaGreen染料法RQ-PCR法,对PRAME转录本克隆质粒进行扩增,评价其特异性、重复性和灵敏性.并对10例AML患者的骨髓单个核细胞标本进行初步检测. 结果:所建立的EvaGreen RQ-PCR法具有良好的特异性,最低可检测到10个拷贝/μl的阳性模板,但其重复性差,而108～102拷贝/μl阳模的重复性良好.10例初诊AML患者PRAME转录本绝对含量为4.91×102～8.07×105拷贝/50ng(中位7.26×103拷贝/50ng),ABL标化后的相对含量为4.42%～13 170.01%(中位67.98%).而对照组8例缺铁性贫血患者中PRAME转录本相对含量为 0.00%～0.01% (中位0).1例AML患者诱导缓解后PRAME转录本下降,复发时又明显升高.结论: EvaGreen染料法RQ-PCR检测PRAME转录本方法敏感可靠,可用于AML患者临床监测.
目的:採用實時定量聚閤酶鏈反應(RQ-PCR)法檢測急性髓繫白血病(AML)中黑色素瘤優先錶達抗原(PRAME)基因轉錄本,初步評價其在AML中的臨床意義. 方法:設計PRAME基因引物,建立擴增PRAME基因轉錄本的EvaGreen染料法RQ-PCR法,對PRAME轉錄本剋隆質粒進行擴增,評價其特異性、重複性和靈敏性.併對10例AML患者的骨髓單箇覈細胞標本進行初步檢測. 結果:所建立的EvaGreen RQ-PCR法具有良好的特異性,最低可檢測到10箇拷貝/μl的暘性模闆,但其重複性差,而108～102拷貝/μl暘模的重複性良好.10例初診AML患者PRAME轉錄本絕對含量為4.91×102～8.07×105拷貝/50ng(中位7.26×103拷貝/50ng),ABL標化後的相對含量為4.42%～13 170.01%(中位67.98%).而對照組8例缺鐵性貧血患者中PRAME轉錄本相對含量為 0.00%～0.01% (中位0).1例AML患者誘導緩解後PRAME轉錄本下降,複髮時又明顯升高.結論: EvaGreen染料法RQ-PCR檢測PRAME轉錄本方法敏感可靠,可用于AML患者臨床鑑測.
목적:채용실시정량취합매련반응(RQ-PCR)법검측급성수계백혈병(AML)중흑색소류우선표체항원(PRAME)기인전록본,초보평개기재AML중적림상의의. 방법:설계PRAME기인인물,건립확증PRAME기인전록본적EvaGreen염료법RQ-PCR법,대PRAME전록본극륭질립진행확증,평개기특이성、중복성화령민성.병대10례AML환자적골수단개핵세포표본진행초보검측. 결과:소건립적EvaGreen RQ-PCR법구유량호적특이성,최저가검측도10개고패/μl적양성모판,단기중복성차,이108～102고패/μl양모적중복성량호.10례초진AML환자PRAME전록본절대함량위4.91×102～8.07×105고패/50ng(중위7.26×103고패/50ng),ABL표화후적상대함량위4.42%～13 170.01%(중위67.98%).이대조조8례결철성빈혈환자중PRAME전록본상대함량위 0.00%～0.01% (중위0).1례AML환자유도완해후PRAME전록본하강,복발시우명현승고.결론: EvaGreen염료법RQ-PCR검측PRAME전록본방법민감가고,가용우AML환자림상감측.
